储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:玉米内源基因PCR试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2784
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human PGE2(Prostaglandin E2) ELISA KitHuman COL15(Collagen Type XV) ELISA Kit2-羟基异丁酸 载玻片细胞CASPASE-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human STK(serine/threonine protein kinase) ELISA KitHuman COL17(Collagen Type XVII) ELISA Kit1-羟基苯并三唑 冰冻切片组织CASPASE-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human GAGs(Glycosaminoglycan) ELISA KitHuman COL1α2(Collagen Type I Alpha 2) ELISA Kit1-羟基苯并三唑 石蜡切片组织CASPASE-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human CLPB/HSP78(Caseinolytic peptidase B protein homolog) ELISA KitHuman COL2(Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit2-羟基-3-三氟甲基吡啶 细胞CASPASE-3蛋白表达比色法定量检测试剂盒
Human NXPE4(NXPE family member 4) ELISA KitHuman COL3(Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit2-羟基-3-三氟甲基吡啶 细胞CASPASE-3蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human KEAP1(kelch-like ECH-associated protein 1) ELISA KitHuman COL4(Collagen Type IV) ELISA Kit1H-咪唑-4-甲酸 CASPASE-3蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human NGFR(p75 neurotrophin receptor) ELISA KitHuman COL5α2(Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit1H-咪唑-4-甲酸CASPASE-3蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human RAMP1(Receptor activity-modifying protein 1) ELISA KitHuman COL6(Collagen Type VI) ELISA Kit羟基乙酰肼CASPASE-3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
玉米内源基因PCR试剂盒白介素25检测试剂盒20mg4-溴-3,5-二甲氧基苯甲醛HPLC98%100mLInterleukin 25,IL-25 ELISA kitHPLC98%白介素25检测试剂盒20mgCGeaCAS号:层析柱 亲和层析柱12mL (1.5*8)486-90-896T破骨细胞刺激因子1(OSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素25检测试剂盒20mgCG36877-69-7高端化学试剂白细胞衍生趋化因子2(LECT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:层析柱 亲和层析柱12mL (1.5*8)529-84-096T肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素24检测试剂盒20mgAlfacalcidol7220-79-3高端化学试剂谷胱甘肽S转移酶α4(GSTα4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素24检测试剂盒20mg叔丁基亚磺酰HPLC98%100mLIL-24 ELISA KitHPLC98%白介素24检测试剂盒20mgAlfacalcidol200mgCAS号:层析柱 亲和层析柱12mL (1.5*8)529-84-096T肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素24检测试剂盒20mgAlfacalcidol7220-79-3高端化学试剂谷胱甘肽S转移酶α4(GSTα4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:层析柱 亲和层析柱30mL (2.3*10)482-82-696T饥饿素(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素23受体检测试剂盒20mgp-P38MAPK7220-79-3高端化学试剂中间α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素23受体检测试剂盒20mg2,8-二溴二苯并噻吩HPLC98%100mLIL-23R ELISA KitHPLC98%白介素23受体检测试剂盒20mgp-P38MAPK15mgCAS号:层析柱 亲和层析柱30mL (2.3*10)482-82-696T饥饿素(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素23受体检测试剂盒20mgp-P38MAPK7220-79-3高端化学试剂中间α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)30mgCAS号:层析柱 亲和层析柱30mL (2.3*10)13114-27-782747-36-296T饥饿素(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素23A检测试剂盒20mgOT7220-79-3高端化学试剂Ⅹ组脂酶A2(PLA2G10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素23A检测试剂盒20mg2,8-二溴二苯并噻吩HPLC98%100mLIL-23A Elisa kitHPLC98%白介素23A检测试剂盒20mgOT30mgCAS号:层析柱 亲和层析柱30mL (2.3*10)13114-27-782747-36-296T饥饿素(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素23A检测试剂盒20mgOT7220-79-3高端化学试剂Ⅹ组脂酶A2(PLA2G10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)5mgCAS号:层析柱 亲和层析柱50mL (2.5*16)13114-27-72107-77-996T饥饿素(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素23检测试剂盒20mgSM-IgG-Ab7220-79-3高端化学试剂剪接因子3B亚基3(SF3B3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素23检测试剂盒20mg1-异氰酸辛酯HPLC98%100mLInterleukin 23,IL-23 ELISA KitHPLC98%白介素23检测试剂盒20mgSM-IgG-Ab5mgCAS号:层析柱 亲和层析柱50mL (2.5*16)13114-27-72107-77-996T饥饿素(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素23检测试剂盒20mgSM-IgG-Ab7220-79-3高端化学试剂剪接因子3B亚基3(SF3B3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号:层析柱 亲和层析柱50mL (2.5*16)13114-27-722084-94-296Tδ-促睡眠肽(δSIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素22检测试剂盒20mgPC4430-25-5高端化学试剂整合素α6(ITGα6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素22检测试剂盒20mg1-异氰酸辛酯HPLC98%100mLInterleukin 22,IL-22 ELISA KITHPLC98%白介素22检测试剂盒20mgPC10mgCAS号:层析柱 亲和层析柱50mL (2.5*16)13114-27-722084-94-296Tδ-促睡眠肽(δSIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素22检测试剂盒20mgPC4430-25-5高端化学试剂整合素α6(ITGα6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:普通层析柱26mm *60cm1637-39-4842-01-396T醛固酮合酶(ALDOS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素-21检测试剂盒20mgPhytase4430-25-5高端化学试剂防御素β103A(DEFβ103A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素-21检测试剂盒20mg1-异氰酸辛酯HPLC98%100mLIL-21 ELISA KitHPLC98%白介素-21检测试剂盒20mgPhytase200mgCAS号:普通层析柱26mm *60cm1637-39-4842-01-396T醛固酮合酶(ALDOS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素-21检测试剂盒20mgPhytase4430-25-5高端化学试剂防御素β103A(DEFβ103A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号:科研用真空采血管 分离胶/促凝剂 玻璃(黄色) 6-10mL (16*100)1637-39-424258-36-496TToll样受体9(TLR9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素20检测试剂盒20mgCAPRIN1314-13-6高端化学试剂凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素20检测试剂盒20mg3-碘邻二甲苯HPLC98%100mLIL-20 ELISA KitHPLC98%白介素20检测试剂盒20mgCAPRIN120mgCAS号:科研用真空采血管 分离胶/促凝剂 玻璃(黄色) 6-10mL (16*100)1637-39-424258-36-496TToll样受体9(TLR9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素20检测试剂盒20mgCAPRIN1314-13-6高端化学试剂凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号:科研用真空采血管 分离胶/促凝剂 玻璃(黄色) 2-3mL (13*75)1637-39-4482-83-796T血管生成素2(ANGPT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素2检测试剂盒20mgRPS3314-13-6高端化学试剂ⅡA组脂酶A2(PLA2G2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素2检测试剂盒20mg3-碘邻二甲苯HPLC98%100mLIL-2 antibody ELISA KitHPLC98%白介素2检测试剂盒20mgRPS320mgCAS号:科研用真空采血管 分离胶/促凝剂 玻璃(黄色) 2-3mL (13*75)1637-39-4482-83-796T血管生成素2(ANGPT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素2检测试剂盒20mgRPS3314-13-6高端化学试剂ⅡA组脂酶A2(PLA2G2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:科研用真空采血管 分离胶/促凝剂 玻璃(黄色) 5mL (13*100)21293-29-82107-76-896T210kDa核孔蛋白(NUP210)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素2检测试剂盒20mgPV-IgG314-13-6高端化学试剂分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素2检测试剂盒20mg3-碘邻二甲苯HPLC98%100mLIL-2 ELISA kitHPLC98%白介素2检测试剂盒20mgPV-IgG25mgCAS号:科研用真空采血管 分离胶/促凝剂 玻璃(黄色) 5mL (13*100)21293-29-82107-76-896T210kDa核孔蛋白(NUP210)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素2检测试剂盒20mgPV-IgG314-13-6高端化学试剂分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1.5mlCAS号:科研用真空采血管 分离胶/促凝剂 玻璃(黄色) 4mL (13*75)21293-29-8111254-18-396T210kDa核孔蛋白(NUP210)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素1受体样1检测试剂盒20mgPV-IgM146-68-9高端化学试剂分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。