PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：玉米MON/MS PCR检测试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2780
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human Total HSP-90(Heat Shock Protein 90 total) ELISA KitHuman CDNF(Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor) ELISA Kit羟乙基淀粉 细胞BCL2蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human CASP5(Caspase-5) ELISA KitHuman CDX2(Homeobox protein CDX-2) ELISA Kit羟乙基淀粉 BCL2蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human Glicentin(Glicentin) ELISA KitHuman CENPA(Centromere Protein A) ELISA Kit1H-吡咯并(2,3-d)嘧啶BCL2蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human RF-IgG(Rheumatoid Factor IgG) ELISA KitHuman CENPF(Centromere Protein F) ELISA Kit2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯BCL2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
Human RF-IgA(Rheumatoid Factor IgA) ELISA KitHuman CFL2(Cofilin 2, Muscle) ELISA Kit1H,1H,2H,2H-全氟癸基三氯硅烷 细胞CASPASE-1蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human RF-IgM(Rheumatoid Factor IgM) ELISA KitHuman CFTR(Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit1H,1H,2H,2H-全氟癸基三氯硅烷载玻片细胞CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human PAX-8(Paired box protein pax-8) ELISA KitHuman CGRP(Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit氢醌二(2-羟基乙基)醚冰冻切片组织CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human CAMP(Cathelicidin Antimicrobial Peptide) ELISA KitHuman CGα(Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA Kit氢醌二(2-羟基乙基)醚石蜡切片组织CASPASE-1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
玉米MON/MS PCR检测试剂盒半乳糖检测试剂盒20mg2,5-二溴噻吩HPLC98%100mLGalactose ELISA KitHPLC98%半乳糖检测试剂盒20mgSERPINA11.2ml×3ampulesCAS号：比色皿 玻璃 微量 3mm 1.05mL480-40-0849213-15-696T胱天蛋白酶2(CASP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%半乳糖检测试剂盒20mgSERPINA13244-88-0高端化学试剂溶血卵脂酰基转移酶3(LPCAT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1.2ml×3ampulesCAS号：比色皿 玻璃 微量 4mm 1.4mL480-40-0481-18-596T着丝粒蛋白E(CENPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%板层素相关多肽2亚型α检测试剂盒5mgRLN-2298-96-4高端化学试剂溶血卵脂酰基转移酶4(LPCAT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
板层素相关多肽2亚型α检测试剂盒5mg2,5-二溴噻吩HPLC98%100mLTMPO ELISA KitHPLC98%板层素相关多肽2亚型α检测试剂盒5mgRLN-21.2ml×3ampulesCAS号：比色皿 玻璃 微量 4mm 1.4mL480-40-0481-18-596T着丝粒蛋白E(CENPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%板层素相关多肽2亚型α检测试剂盒5mgRLN-2298-96-4高端化学试剂溶血卵脂酰基转移酶4(LPCAT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)150mgCAS号：比色皿 玻璃 微量 5mm 1.75mL551-16-61745-36-496T甘胆酸(CG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%瘢痕性天疱疮抗体检测试剂盒5mgUGT1A1298-96-4高端化学试剂泛素蛋白连接酶E3成分N-识别蛋白4(UBR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品瘢痕性天疱疮抗体检测试剂盒5mg2,5-二溴噻吩HPLC98%100mLcicatricial Pemphigoid,CP ELISA KitHPLC98%瘢痕性天疱疮抗体检测试剂盒5mgUGT1A1150mgCAS号：比色皿 玻璃 微量 5mm 1.75mL551-16-61745-36-496T甘胆酸(CG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%瘢痕性天疱疮抗体检测试剂盒5mgUGT1A1298-96-4高端化学试剂泛素蛋白连接酶E3成分N-识别蛋白4(UBR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号：比色皿 石英 5mm 1.7.mL551-16-627013-91-896T肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%百日咳病抗体检测试剂盒20mgDVNS1 298-96-4高端化学试剂非ATP酶蛋白酶体26S亚基10(PSMD10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品百日咳病抗体检测试剂盒20mgNocodazoleHPLC98%100mLbordetella pertussis antibody IgM ELISA kitHPLC98%百日咳病抗体检测试剂盒20mgDVNS1 100mgCAS号：比色皿 石英 5mm 1.7.mL551-16-627013-91-896T肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%百日咳病抗体检测试剂盒20mgDVNS1 298-96-4高端化学试剂非ATP酶蛋白酶体26S亚基10(PSMD10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1mlCAS号：比色皿 石英10mm 3.5mL551-16-66147-11-196T高铁血红蛋白还原酶(MHBR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%百日咳病抗体检测试剂盒20mgADAMTS13298-96-4高端化学试剂肝配蛋白A受体3(EPHA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品百日咳病抗体检测试剂盒20mgNocodazoleHPLC98%100mLbordetella pertussis antibody IgA ELISA kitHPLC98%百日咳病抗体检测试剂盒20mgADAMTS131mlCAS号：比色皿 石英10mm 3.5mL551-16-66147-11-196T高铁血红蛋白还原酶(MHBR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%百日咳病抗体检测试剂盒20mgADAMTS13298-96-4高端化学试剂肝配蛋白A受体3(EPHA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：比色皿 石英20mm 7mL29676-71-97488-99-596T谷氨酸脱氢酶(GDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白血病抑制因子受体检测试剂盒20mgCTRP91719-71-7高端化学试剂含杆状病IAP重复蛋白6(BIRC6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品白血病抑制因子受体检测试剂盒20mg3-甲基-3-氧杂环丁烷甲醇HPLC98%100mLLIFR ELISA KitHPLC98%白血病抑制因子受体检测试剂盒20mgCTRP915mgCAS号：比色皿 石英20mm 7mL29676-71-97488-99-596T谷氨酸脱氢酶(GDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白血病抑制因子受体检测试剂盒20mgCTRP91719-71-7高端化学试剂含杆状病IAP重复蛋白6(BIRC6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号：比色皿 石英 30mm 10.5mL29676-71-97785-26-496T谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC95%白细胞酯酶检测试剂盒0.5mLAnti-HIV Ab1719-71-7高端化学试剂非红细胞血影蛋白β4(SPTβN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品白细胞酯酶检测试剂盒0.5mL3-甲基-3-氧杂环丁烷甲醇GC95%100mLLeukocyte esterase,LE ELISA KitGC95%白细胞酯酶检测试剂盒0.5mLAnti-HIV Ab500mgCAS号：比色皿 石英 30mm 10.5mL29676-71-97785-26-496T谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC95%白细胞酯酶检测试剂盒0.5mLAnti-HIV Ab1719-71-7高端化学试剂非红细胞血影蛋白β4(SPTβN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号：比色皿 石英 40mm 14mL29676-71-91081-34-196T谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4检测试剂盒20mgHSPG1871-22-3高端化学试剂生长激素促分泌素受体(GHSR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4检测试剂盒20mg3-甲基-3-氧杂环丁烷甲醇GC98%100mLLILRB4 ELISA KitGC98%白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4检测试剂盒20mgHSPG10mgCAS号：比色皿 石英 40mm 14mL29676-71-91081-34-196T谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4检测试剂盒20mgHSPG1871-22-3高端化学试剂生长激素促分泌素受体(GHSR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1.2ml×3ampulesCAS号：比色皿 石英 50mm 17mL23593-75-110482-56-196T乳过氧化物酶(LPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%白细胞抗原DR检测试剂盒20mgFbg-Ab1871-22-3高端化学试剂肌红蛋白(MYO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品白细胞抗原DR检测试剂盒20mg硝酸钙-15N2GC98%100mLLeukocyte Antigen-DR,HLA-DR ELISA KitGC98%白细胞抗原DR检测试剂盒20mgFbg-Ab1.2ml×3ampulesCAS号：比色皿 石英 50mm 17mL23593-75-110482-56-196T乳过氧化物酶(LPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%白细胞抗原DR检测试剂盒20mgFbg-Ab1871-22-3高端化学试剂肌红蛋白(MYO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号：比色皿 石英 100mm 35mL23593-75-12883-98-996T核糖核酸酶A(RNASE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白细胞活化黏附因子检测试剂盒100mgNT-proBNP553-24-2高端化学试剂胰脂肪酶(PL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品白细胞活化黏附因子检测试剂盒100mg硝酸钙-15N2HPLC98%100mLALCAM ELISA KitHPLC98%白细胞活化黏附因子检测试剂盒100mgNT-proBNP50mgCAS号：比色皿 石英 100mm 35mL23593-75-12883-98-996T核糖核酸酶A(RNASE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白细胞活化黏附因子检测试剂盒100mgNT-proBNP553-24-2高端化学试剂胰脂肪酶(PL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)250mgCAS号：比色皿 石英 微量 1mm 0.35mL518-75-2473-08-596T甲状腺结合球蛋白(TBG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白细胞调节素检测试剂盒20mgCoQ10553-24-2高端化学试剂肾上腺素能受体β1(ADRβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
