储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:鱼特定基因序列PCR 试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2772
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human CVB-IgM(Coxsackievirus B-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman ATF-3(Activating Transcription Factor 3) ELISA KitD-对羟基苯甘氨酸 载玻片细胞PDGF-A蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human CVB-IgG(Coxsackievirus B-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman ATF-4(Activating Transcription Factor 4) ELISA KitD-对羟基苯甘氨酸 冰冻切片组织PDGF-A蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human ECHO-IgG(Enteric CytopathicHuman Orphan virus-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman ATF-6(Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit二氯二茂铪 石蜡切片组织PDGF-A蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human ECHO-IgM(Enteric CytopathicHuman Orphan virus-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐 细胞PDGF-A蛋白表达比色法定量检测试剂盒
Human HDV-IgM(Hepatitis D Virus-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman ATXN1(Ataxin 1) ELISA Kit1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐 细胞PDGF-A蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human TOX-IgM(Toxoplasma-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman Aβ40(Amyloid Beta 40) ELISA Kit1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐 PDGF-A蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human TOX-IgG(Toxoplasma-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman Aβ42(Amyloid Beta 42) ELISA Kit羟丙基纤维素PDGF-A蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human EV71-IgG(Enterovirus 71-Immunoglobulin G) ELISA KitHuman BACE1(Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit羟丙基纤维素PDGF-A蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
鱼特定基因序列PCR 试剂盒超敏热休克蛋白70检测试剂盒20mgN,N-二乙基-1,1,2,3,3,3-六氟丙胺HPLC98%100mLUltra Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA KitHPLC98%超敏热休克蛋白70检测试剂盒20mgPAP10mgCAS号:虎红琼脂155141-29-0172481-83-396T钙调酸酶(CaN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%超敏热休克蛋白70检测试剂盒20mgPAP29953-71-7高端化学试剂Abl交互子3(ABI3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂155141-29-0121104-96-996T钙调结合蛋白(CALD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%超敏热休克蛋白60检测试剂盒20mgHCV-IgM3121-70-8高端化学试剂胰多肽2(PPY2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
超敏热休克蛋白60检测试剂盒20mgN-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸HPLC98%100mLUltra Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA KitHPLC98%超敏热休克蛋白60检测试剂盒20mgHCV-IgM200mgCAS号:酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂155141-29-0121104-96-996T钙调结合蛋白(CALD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%超敏热休克蛋白60检测试剂盒20mgHCV-IgM3121-70-8高端化学试剂胰多肽2(PPY2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:代酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂(TCBS)1476-53-5290821-39-596T神经丝蛋白3(NEF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%超敏前列腺特异性抗原检测试剂盒20mgHCV-Ab3121-70-8高端化学试剂O-岩藻糖肽3-β-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(RFNG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
超敏前列腺特异性抗原检测试剂盒20mgN-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸HPLC98%100mLUltra Sensitive Prostate Specific Antigen,PSA U S ELISA KitHPLC98%超敏前列腺特异性抗原检测试剂盒20mgHCV-Ab200mgCAS号:代酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂(TCBS)1476-53-5290821-39-596T神经丝蛋白3(NEF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%超敏前列腺特异性抗原检测试剂盒20mgHCV-Ab3121-70-8高端化学试剂O-岩藻糖肽3-β-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(RFNG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号:马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA培养基)1476-53-5350588-96-496T生长关联蛋白43(GAP43)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%超敏C反应蛋白检测试剂盒10mgACT-IgG Ab 3094-09-5高端化学试剂RAD1同源物(RAD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
超敏C反应蛋白检测试剂盒10mgN-叔丁氧羰基-2-甲基丙氨酸HPLC98%100mLhigh sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA KitHPLC98%超敏C反应蛋白检测试剂盒10mgACT-IgG Ab100mgCAS号:马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA培养基)1476-53-5350588-96-496T生长关联蛋白43(GAP43)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%超敏C反应蛋白检测试剂盒10mgACT-IgG Ab 3094-09-5高端化学试剂RAD1同源物(RAD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:麦芽提取物1476-53-577-95-296T肌腱蛋白R(TNR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%超酸化微管相关蛋白tau检测试剂盒20mgsAPPα 3094-09-5高端化学试剂Nodal同源物(NODAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
超酸化微管相关蛋白tau检测试剂盒20mg(R)-3-Boc-氨基哌啶GC98%100mLhyper phosphorylated MAPT ELISA kitGC98%超酸化微管相关蛋白tau检测试剂盒20mgsAPPα25mgCAS号:麦芽提取物1476-53-577-95-296T肌腱蛋白R(TNR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%超酸化微管相关蛋白tau检测试剂盒20mgsAPPα 3094-09-5高端化学试剂Nodal同源物(NODAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号:麦康凯琼脂7681-93-858-86-696T微管关联蛋白2(MAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC99%肠脂肪酸结合蛋白检测试剂盒20mgHPD 3094-09-5高端化学试剂N-α-乙酰转移酶15(NαA15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
肠脂肪酸结合蛋白检测试剂盒20mg(R)-3-Boc-氨基哌啶HPLC99%100mLiFABP ELISA KitHPLC99%肠脂肪酸结合蛋白检测试剂盒20mgHPD100mgCAS号:麦康凯琼脂7681-93-858-86-696T微管关联蛋白2(MAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC99%肠脂肪酸结合蛋白检测试剂盒20mgHPD 3094-09-5高端化学试剂N-α-乙酰转移酶15(NαA15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)350mgCAS号:牛肉膏蛋白胨肉汤7681-93-8636-61-396T黑色素瘤关联ME20(ME20M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC90%肠三叶因子检测试剂盒20mgCOPS210605-21-7高端化学试剂N-α-乙酰转移酶50(NαA50)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
肠三叶因子检测试剂盒20mg腺苷-5'-二酸三锂HPLC90%100mLIntestinal trefoil factor,ITF ELISA KitHPLC90%肠三叶因子检测试剂盒20mgCOPS2350mgCAS号:牛肉膏蛋白胨肉汤7681-93-8636-61-396T黑色素瘤关联ME20(ME20M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC90%肠三叶因子检测试剂盒20mgCOPS210605-21-7高端化学试剂N-α-乙酰转移酶50(NαA50)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:牛肉膏蛋白胨琼脂723-46-650-99-796T套膜蛋白(iNV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%肠道病71型检测试剂盒100mgCOPS2 Ab10605-21-7高端化学试剂镁离子转运蛋白1(MAGT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
肠道病71型检测试剂盒100mg腺苷-5'-二酸三锂HPLC98%100mLenterovirus 71 virus你HPLC98%肠道病71型检测试剂盒100mgCOPS2 Ab200mgCAS号:牛肉膏蛋白胨琼脂723-46-650-99-796T套膜蛋白(iNV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%肠道病71型检测试剂盒100mgCOPS2 Ab10605-21-7高端化学试剂镁离子转运蛋白1(MAGT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:麦康凯琼脂723-46-6203191-10-096T鸟氨酸脱羧酶(ODC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%层粘连蛋白亚基γ-2检测试剂盒20mgCCL110605-21-7高端化学试剂Kindlin 3蛋白(KIND3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
层粘连蛋白亚基γ-2检测试剂盒20mg腺苷-5'-二酸三锂HPLC98%100mLLAMC2 ELISA KitHPLC98%层粘连蛋白亚基γ-2检测试剂盒20mgCCL1200mgCAS号:麦康凯琼脂723-46-6203191-10-096T鸟氨酸脱羧酶(ODC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%层粘连蛋白亚基γ-2检测试剂盒20mgCCL110605-21-7高端化学试剂Kindlin 3蛋白(KIND3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:麦芽汁琼脂723-46-6461432-26-896T粘着斑激酶(FAK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%层粘连蛋白β1检测试剂盒20mgRIG-I23564-05-8高端化学试剂Kindlin 1蛋白(KIND1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
层粘连蛋白β1检测试剂盒20mg8-氟-4-羟基-2-三氟甲基喹啉HPLC98%100mLLaminin β1,LN-β1 ELISA KitHPLC98%层粘连蛋白β1检测试剂盒20mgRIG-I200mgCAS号:麦芽汁琼脂723-46-6461432-26-896T粘着斑激酶(FAK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%层粘连蛋白β1检测试剂盒20mgRIG-I23564-05-8高端化学试剂Kindlin 1蛋白(KIND1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:麦芽汁肉汤25316-40-9199796-52-696T微管关联蛋白6(MAP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%层粘连蛋白-5检测试剂盒20mgCoxV-B323564-05-8高端化学试剂Sentan蛋白(SNTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。