储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:跳跃病病毒PCR试剂盒
英文名称:Louping Ill VirusRTPCR
编号: FSP1847
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Connexin 43间隙连接蛋白43抗体特价促销anti- Lin28A-specific antibody组织亚硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒软骨细胞蛋白39抗体
Phospho-Connexin 43(Ser368)磷酸化Connexin 43蛋白抗体特价促销anti- LIN28B antibody血液亚硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒14-3-3E蛋白抗体
HAS1/Hyaluronan synthase 1透明质酸合成酶1抗体特价促销anti- Lin28B-specific antibody体液亚硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒y-盒结合蛋白1抗体
Connexin-45间隙连接蛋白45抗体特价促销anti- LIN41 antibody细胞亚硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒磷酸化14-3-3E蛋白抗体
CXCR1/IL-8RA细胞表面趋化因子受体1抗体特价促销anti- LIN7A antibody组织亚硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体
SRPK1丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SRPK1抗体特价促销anti- LIN7B antibody血液亚硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗体
CXCR2/CD182细胞表面趋化因子受体2抗体特价促销anti- LIN7C antibody体液亚硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒核转录调节因子YY1抗体
BNIP3L促凋亡BNIP3L蛋白抗体特价促销anti- LIN9 antibody细胞辅酶A含量比色法定量检测试剂盒核酸敏感元件结合蛋白1
跳跃病病毒PCR试剂盒Wild type Cdc42 protein, His-taggedKCNE1 钾离子通道蛋白家族成员1抗体 4-溴-1H-吡咯-2-羧酸甲酯Ofloxacin;氧氟沙星
Wild type Cdc42 protein, GST-taggedKCNE1L 钾离子通道蛋白家族成员1样蛋白抗体 1-(2-甲氧基苯基)哌嗪氢溴酸盐Lomefloxacin 洛美沙星
MKLP kinesin motor domain proteinKCNE2 钾离子通道蛋白家族成员2抗体 2'-溴-4'-氟乙酰苯胺Pefloxacin 培氟沙星
MKLP kinesin motor domain proteinKCNJ5 G蛋白激活内向钾通道5抗体 对羟基苯丁酮Pseudolaric Acid B;土荆皮乙酸
MKLP kinesin motor domain proteinC11ORF46 11号染色体开放阅读框46抗体 2-羟基环戊烷羧酸甲酯Echinacoside;松果菊苷
MCAK kinesin motor domain proteinC11ORF67/PTD015 11号染色体开放阅读框67抗体 3-甲氧基甲苯Ganciclovir;更昔洛韦
MCAK kinesin motor domain proteinC11ORF77/HARBI1 11号染色体开放阅读框77抗体 (R)-(+)-2-苄氧基丙酸3-Indolebutyric Acid/IPA;吲哚丙酸
MCAK kinesin motor domain proteinC11ORF16 11号染色体开放阅读框16抗体 2,3,5-三氯苯酚Ethyl gallate;没食子酸乙酯
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。