拉沙热病毒PCR检测试剂盒

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：拉沙热病毒PCR检测试剂盒
英文名称：Lassa Fever Virus(LASV)RTPCR
编号： FSP1825
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
CK1+5+10+14高分子量角蛋白抗体特价促销anti- KLF5 antibody细胞磷酸二酯酶4（PDE4）活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗体

Cytokeratin 13/CK-HMW高分子量细胞角蛋白抗体特价促销anti- KLF6 antibody组织磷酸二酯酶4（PDE4）活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒泛素结构域蛋白1抗体

CKIP-1酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗体特价促销anti- KLHDC3 antibody血液磷酸二酯酶4（PDE4）活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒肌营养不良蛋白相关蛋白1抗体

CKMT2肌酸磷酸激酶2抗体特价促销anti- KLHDC4 antibody细胞磷酸二酯酶4（PDE4）活性荧光定量检测试剂盒神经突起诱导因子受体UNC5B抗体

Clostridium perfringens type DD型产气荚膜梭菌抗体特价促销anti- KLHDC5 antibody组织磷酸二酯酶4（PDE4）活性荧光定量检测试剂盒神经突起生长诱导因子受体UNC5B抗体

CITED1/ABCC1结合转化激活因子CITED1抗体特价促销anti- KLHL10 antibody血液磷酸二酯酶4（PDE4）活性荧光定量检测试剂盒神经突起生长诱导因子受体UNC5D抗体

CLCA4钙激活氯离子通道4抗体特价促销anti- KLHL12 antibody细胞磷酸二酯酶5（PDE5）活性酶连续循环定磷比色法定量检测试剂盒神经突起生长诱导因子受体Unc5a抗体

CLEC1/CLEC1AC型凝集素结构域家族1成员A抗体特价促销anti- KLHL13 antibody组织磷酸二酯酶5（PDE5）活性酶连续循环定磷比色法定量检测试剂盒UBX结构域域蛋白D2抗体
拉沙热病毒PCR检测试剂盒ADP-Glo™ Kinase AssayFGF14  成纤维细胞生长因子14抗体 左旋氨氯地平头孢呋辛钠 >855ug/MG

ADP-Glo™ Kinase AssayFGF18  成纤维细胞生长因子18抗体 8-氨基辛酸Sinigrin monohydrate；黑芥子硫苷酸钾一水

SignaTECT® Calcium/Calmodulin-Dependent Protein Kinase(CaM Kll) Assay SystemsBCL7C  B细胞白血病/淋巴瘤蛋白7抗体 柠檬酸铜Nonadecanoic acid；十九烷酸

SAM2?96 Biotin Capture Platephospho-Stathmin 1 (Ser63)  磷酸化原癌基因蛋白18抗体 3-[2-(Boc-氨基)乙基]氮杂环丁烷盐酸盐n-Tetracosane；正二十四烷

Kinase-Glo?Luminescent Kinase Assaysphospho-Stathmin 1 (Ser24)  磷酸化原癌基因蛋白18抗体 3-Boc-氨甲基氮杂环丁烷盐酸盐Chlortetracycline HCl；盐酸金霉素

Kinase-Glo?Max Luminescent Kinase AssayINTS3  集成复杂蛋白亚单位3抗体 1-高哌嗪羧酸苄酯Tetracycline hydrochloride；盐酸四环素

Kinase-Glo?Plus Luminescent Kinase AssaysC10orf4/FRA10AC1  10号染色体开放阅读框4抗体 1H-吡唑基[3,4-B]吡啶-3-羧酸Pentoxifylline；己酮可可碱

ProFluor® PKA AssaysC10orf47  10号染色体开放阅读框47抗体 1-羟基-1-环已基甲酸乙酯Malvinidol chloride；氯化锦葵素
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。