产品名称:附红细胞体属通用PCR试剂盒
英文名称:Eperythrozoon spp.PCR
编号: FSP1620
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
ENTHD1/Epsin2BEpsin2B蛋白抗体特价促销anti- Fascin antibody体液高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷酸化蛋白激酶C抗体
JMJD7组蛋白去甲基转移酶JMJD7抗体特价促销anti- FASN antibody细胞培养液高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷酸化肿瘤抑制基因PTEN抗体
C9ORF469号染色体开放阅读框46抗体特价促销anti- FASTKD2 antibody通用型低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亚单位A抗体
LACE1泌乳升高蛋白1抗体特价促销anti- FASTKD3 antibody细胞低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗体
C9orf869号染色体开放阅读框86抗体特价促销anti- FATE1 antibody组织低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体
C9orf1749号染色体开放阅读框174抗体特价促销anti- FATP4 antibody体液低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体
SOSSC/C9orf80单链DNA结合蛋白相互作用蛋白1特价促销anti- FAU antibody细胞培养液低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷脂酰肌醇激酶3催化亚单位3抗体
Brain protein CG6脑蛋白CG6抗体特价促销anti- FBF1 antibody通用型总脂蛋白胆固醇(Total L-Cholesterol)酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷脂酰肌醇激酶p85β抗体
附红细胞体属通用PCR试剂盒Homo sapiens, humanGGCX γ-谷氨酰羧化酶抗体4-羟基苯乙胺枸橼酸喷托维林进口/国产Necdin 生长抑制蛋白NDN抗体含量:HPLC法含量测定
Homo sapiens, humanFactor VII light chain 凝血因子VII4-羟基苯乙胺酸钠进口/国产RPRD1A/P15RS 细胞周期依性激酶抑制相关蛋白抗体含量:HPLC含量测定
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Myosin VIIa/DFNB2 肌球蛋白7a/常染色体隐性耳聋蛋白2抗体氰乙酸叔丁酯烟酸进口/国产PCNP PEST含核蛋白抗体含量:HPLC法含量测定用
frozenFactor X 凝血因子10抗体氰乙酸叔丁酯帕司烟肼(对氨水杨酸)进口/国产PLK4/STK18 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶18含量:UV法溶出度检查
Homo sapiens, human kidney; Derived from me ..NIR2 膜磷脂转移蛋白1抗体曲拉通X-114曲匹布通进口/国产Quiescin Q6/QSOX1 巯化酶1抗体含量:UV法含量测定用
Ensifer adhaerens CasidaNUSAP1 核仁和纺锤体相关蛋白1抗体1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯曲匹地尔进口/国产LEU5/RFP2 白血病相关蛋白5抗体含量:TLC法检查用
Plasmodium inui Halberstaedter and von Prow ..RAB35 RAS相关蛋白癌基因Rab35抗体1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯桂美酸进口/国产SAPK3/MAPK12 应激活化蛋白激酶3抗体(丝裂原活化蛋白激酶12)含量:UV法溶出度检查
Margaritispora aquatica Ingold, anamorphRACGAP1 Rho GTP酶激活蛋白GAP抗体1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯奥拉米特进口/国产SCGB3A1 结合珠蛋白家族3A1抗体含量:UV法溶出度检查用