PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：肠道病毒组PCR试剂盒
英文名称：Enterovirus(EV)ARTPCR
编号： FSP1618
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
IRX5Iroquois同源蛋白5抗体特价促销anti- FAM98C antibody血液尿酸含量直接（TPTZ）比色法定量检测试剂盒朊/感染性蛋白抗体
MEF2B肌细胞增强因子2B抗体特价促销anti- FANCA antibody体液尿酸含量直接（TPTZ）比色法定量检测试剂盒P选择素糖蛋白配体1抗体
MESP1心血管发育中胚层相关蛋白1抗体特价促销anti- FANCA-Specific antibody组织尿酸含量直接（TPTZ）比色法定量检测试剂盒磷酸化桩蛋白Paxillin抗体
Myocardin促血管平滑肌细胞分化因子抗体特价促销anti- FANCC antibody血液尿酸含量酶偶联比色法定量检测试剂盒穿孔素抗体
NFAT5活化T细胞核因子5蛋白抗体特价促销anti- FANCD2 antibody体液尿酸含量酶偶联比色法定量检测试剂盒磷脂酰丝氨酸脱羧酶PISD抗体
phospho-NFAT5 (Ser1197)磷酸化活化T细胞核因子5蛋白抗体特价促销anti- FANCD2-phospho(S330) antibody组织尿酸含量酶偶联比色法定量检测试剂盒p21蛋白抗体
CNN2平滑肌钙调蛋白CNN2抗体特价促销anti- FANCG antibody胱蛋白酶抑制剂（Cystatin C）定量检测试剂盒蛋白酪氨酸磷酸酶CD148抗体
Wnt16信号通路Wnt16抗体特价促销anti- FANCI antibody糖化血红蛋白（HbA1c）比色法定量检测试剂盒蛋白激酶C theta抗体
肠道病毒组PCR试剂盒frozenFMN2 形成素2抗体（成蛋白）三乙基硅烷芬布芬进口/国产CGR19 细胞生长调控蛋白19抗体（环指蛋白197）含量：含量测定用
Cryptosporiopsis abietina Petrak, anamorphHIST1H2AH 组蛋白H2A/S抗体三十醇曲可芦进口/国产FPR3/Lipoxin A4 receptor 酰肽受体3抗体（脂A4受体）含量：HPLC法含量测定用
Rhizopogon colossus Smith apud Smith et Zel ..KIF20A/MKLP2 有丝分裂驱动蛋白样2抗体三十醇二羟茶进口/国产CHMP1A 染色体修饰蛋白1抗体（金属蛋白酶1）含量：HPLC法含量测定
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..TRIM25 雌激素反应锌指蛋白抗体3-(三氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸茜双酯进口/国产DDIT4L DNA损伤诱导转录样蛋白4抗体含量：UV法含量测定
Delacroixia coronata (Costantin) Saccardo e ..phospho-TRIM25(The91) 磷酸化雌激素反应指状蛋白抗体牛磺熊去氧胆酸酸进口/国产DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 畸形表皮自调节因子1抗体含量：HPLC法含量测定用
Cryphonectria parasitica (Murrill) Barr, te ..TIP47/M6PRBP1 脂滴相关蛋白TIP47抗体四丙基氢氧化铵盐酸地巴唑进口/国产EID3 E1A样分化抑制因子3抗体含量：HPLC法含量测定用
frozenTLS/FUS 粘液样脂肪肉瘤蛋白FUS1抗体四丙基氢氧化铵酸喹进口/国产ERCC6L 发育相关蛋白ERCC6L抗体（醇致畸因子）含量：HPLC法含量测定用
Hericium erinaceus (Bulliard : Fries) Perso ..KIF2B 有丝分裂驱动蛋白样2B抗体硫酸钛盐酸异嗪进口/国产FAM107A 细胞癌下调蛋白1抗体含量：含量测定（HPLC）
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
