抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、产品仅用于科研进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
参数规格:
产品名称
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磷酸化蛋白激酶AKT3抗体
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英文名称
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Anti-phospho-AKT3 (Ser472)
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规格
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0.1ml/100μg
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产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
英文名称 Anti-phospho-AKT3 (Ser472)
中文名称 磷酸化蛋白激酶AKT3抗体
别 名 Akt3; AKT3 kinase; AKT3_HUMAN; DKFZp434N0250; PKB gamma; PKBG; PRKBG; Protein kinase Akt-3; Protein Kinase AKT3; Protein kinase B gamma; RAC gamma; RAC gamma serine/threonine protein kinase; RAC-gamma serine/threonine-protein kinase; RAC-PK-gamma; RACPK Gamma; Serine threonine protein kinase Akt 3; Serine threonine protein kinase Akt3; STK 2; STK-2; STK2; V akt murine thymoma viral oncogene homolog 3 protein kinase B gamma.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human AKT3 around the phosphorylation site of Ser472
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.产品仅用于科研用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
下列是磷酸化蛋白激酶AKT3抗体 的相关热销产品:
FBXL8 ELISA Kit>99%甲状腺激素受体β试剂盒
FANCL ELISA KitHPLC>98%,标准品甲状腺过氧化物酶试剂盒
FBXL15 ELISA Kit>99%甲状腺非肽激素抗体试剂盒
FANCM ELISA Kit>98%甲状腺刺激免疫球蛋白试剂盒
FAM76A ELISA Kit>99%,BR甲状旁腺激素相关蛋白试剂盒
FARS2 ELISA KitHPLC>98%,标准品甲状旁腺激素1受体试剂盒
FARSA ELISA Kit>98%,BR甲状旁腺激素1-34试剂盒
FAM78A ELISA Kit>98%,标准品甲状旁腺激素1-34试剂盒
FAM84B ELISA Kit>97%甲状旁腺激素试剂盒
FAM8A1 ELISA Kit含量>90%%,BR甲酰甲硫氨酸试剂盒
FAM92A1 ELISA Kit含量测定,标准品甲肟前列腺素D2试剂盒
FAM46B ELISA Kit>98%,效价>900µg/mg,BR,可用于细胞培养甲基化DNA[蛋白]半胱氨酸S甲基转移酶elisa试剂盒
FAM49B ELISA Kit标准品用于含量测定甲基化CpG结合蛋白2试剂盒
FAM48A ELISA KitPurity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade脊髓灰质炎病毒抗原试剂盒
FAM50A ELISA KitHPLC≥98%,标准品脊髓灰质炎病毒试剂盒
FAM57B ELISA Kit>90%,BR己糖激酶3试剂盒
FAM65B ELISA Kit含量测定,标准品己糖激酶试剂盒
FAM175A ELISA Kit>99%几丁质酶3样蛋白1试剂盒
磷酸化蛋白激酶AKT3抗体 Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum种属:Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum
提供形式:试管斜面
安全等级:1
模式菌株:no
应用领域:棉花枯萎病菌
培养方法
培养基:综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏水中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。
生长条件:24-28℃,好氧
存储条件:4℃,避光冷藏尖镰孢萎蔫专化型(斜面)