12号染色体开放阅读框53抗体

抗体的制备过程：

1. 免疫原的制备

普通的大分子蛋白，产品仅用于科研通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。

小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫动物

常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集

一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。

4. 免疫血清的纯化与鉴定

得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。

5. 免疫血清的保存

建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。

参数规格：

产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复）
英文名称  Anti-C12ORF53 

中文名称  12号染色体开放阅读框53抗体  

别    名  Chromosome 12 open reading frame 53; DKFZp547D2210; Hypothetical protein LOC196500; Uncharacterized protein C12orf53; PIANP_HUMAN.

浓    度  1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg  

抗体来源  Rabbit  

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep   

产品类型  一抗    
研究领域  细胞生物 免疫学  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 27kDa

性    状  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human C12ORF53

亚    型  IgG

纯化方法  affinity purified by Protein A

储 存 液  Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

抗体分子标记技术：

（一）原理

产品仅用于科研当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

（二）准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；

2.仪器

凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。

（三）操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；

2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

抗体制备过程：

1.材料与试剂

  a．提取的动物 Ig

  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂

  c．青霉素和链霉素

  d．实验动物 兔

  e．其它材料及试剂

2、选择实验活体。

3、进行动物免疫实验。

4、试取血样进行测试，查看免疫效果。

5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。

6、纯化出抗体。

7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

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