"HEK293-EBNA Cells|人胚肾细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
L-Wnt3A细胞系相关产品:Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞
EHEB细胞系相关产品:KYSE-270细胞、SK-N-DZ细胞、Rh30细胞
RSC96细胞系相关产品:PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞
细胞生长:贴壁
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
HEK293-EBNA Cells|人胚肾细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Mouse Colon 38细胞系相关产品:KTC1细胞、SNU-484细胞、MDA-231细胞
HEC-1A细胞系相关产品:Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
T/G HA VSMC细胞系相关产品:10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
D-283MED细胞系相关产品:293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞
细胞传代方法:1:4-1:10传代;每周2次。
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HEK293-EBNA Cells|人胚肾细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
SK Mel 24细胞系相关产品:Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞
LK-2细胞系相关产品:RAEC细胞、COLO 829细胞、A1847细胞
Rca-B细胞系相关产品:GT39细胞、MDA-MB 231细胞、NCI-H1792细胞
LTEP-sm细胞系相关产品:NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较高,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
NCI-SNU-449细胞系相关产品:MDA-MB-330细胞、D-341Med细胞、EOC20细胞
GS-9L细胞系相关产品:BC-028细胞、Neukoplast细胞、OAW42细胞
BE2M17细胞系相关产品:LLC-PK-1细胞、KU 19-19细胞、Ketr-3细胞
NGEC细胞系相关产品:Duke University 145细胞、TCam-2细胞、SF-763细胞
HSC-4细胞系相关产品:RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞
P3-NS1/1Ag 4.1细胞系相关产品:SIRC细胞、VERO C 1008细胞、H-2122细胞
Onda 11细胞系相关产品:SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
K299细胞系相关产品:CL34细胞、H-2347细胞、NK-92细胞
HEK293-EBNA Cells|人胚肾细胞系
AM-38细胞系相关产品:NRK52E细胞、EBNA-293细胞、HN-6细胞
LIM 1215细胞系相关产品:U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
Hs274T细胞系相关产品:NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞
CCD-1095Sk细胞系相关产品:SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞
QBC(939)细胞系相关产品:HSC(Human Schwann)细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
LK 2细胞系相关产品:MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
MEG-01细胞系相关产品:NCI-H165细胞、CAL 33细胞、LOU-NH91细胞
PLA801C细胞系相关产品:MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
PLA801C细胞系相关产品:MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
OVCAR10细胞系相关产品:U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞
SNU-C2B细胞系相关产品:MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞
P-815细胞系相关产品:P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞
PANC.1细胞系相关产品:HEK293T/17细胞、Kupffer细胞、SCC 9细胞
SNU601细胞系相关产品:KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品:MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞
IFRS1细胞系相关产品:SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞
KYSE 70细胞系相关产品:REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞
CHP126细胞系相关产品:HC-11细胞、HCC2935细胞、LS174细胞
COLO-320细胞系相关产品:AML-12细胞、LLCMK2细胞、SSP-25细胞
Onda 11细胞系相关产品:SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
FAK+/+细胞系相关产品:NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞
JEG3细胞系相关产品:L428细胞、CCRF-CEM C1细胞、HuO9细胞
PA-TU S细胞系相关产品:NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞
MDA-MB-134 VI细胞系相关产品:G292细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞、Plaepi 34细胞
H1563细胞系相关产品:GM00346细胞、T98细胞、MT2细胞
A431细胞系相关产品:HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞
TOV112细胞系相关产品:SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞
PANC0327细胞系相关产品:3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
HCC-2935细胞系相关产品:746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞
PG-BE1细胞系相关产品:H-1792细胞、SUPT-1细胞、H510A细胞
NCIH2196细胞系相关产品:HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞
Mel RM细胞系相关产品:MFC细胞、HEK-293-F细胞、H2135细胞
VM-CUB-I细胞系相关产品:SHIN-3细胞、HFL 1细胞、HOS(TE85)细胞
RPE D407细胞系相关产品:WM115F细胞、MGHU3细胞、SW-480细胞
CHAGOK1细胞系相关产品:Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞
OCI-Ly3细胞系相关产品:C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
FAK+/+细胞系相关产品:NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞
Hep-G2/C3A细胞系相关产品:alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
C26细胞系相关产品:LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品:H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
TE-85细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞
KMM-1细胞系相关产品:MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
AN3CA细胞系相关产品:MB 157细胞、C6661细胞、Rat podocyte细胞
NCI-H2291细胞系相关产品:NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
CCRF.CEM细胞系相关产品:OCIAML2细胞、SUDHL-16细胞、Hs 688(A).T细胞
KYSE 50细胞系相关产品:HeLa S3细胞、HM1900细胞、Huh7.5.1细胞
Panc-08.13细胞系相关产品:C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞
MV3细胞系相关产品:TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
Vx2细胞系相关产品:697细胞、NCIH2196细胞、Psi-2 DAP细胞
NCI-H1092细胞系相关产品:RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞
MDA-1386细胞系相关产品:786-0细胞、VMM-5A细胞、SK BR 03细胞
HEK293-EBNA Cells|人胚肾细胞系
IM95细胞系相关产品:CORL279细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、LSECs细胞
MCF-7细胞系相关产品:MONO-MAC 6细胞、KP-N-YN细胞、H-1648细胞
BE2M17细胞系相关产品:LLC-PK-1细胞、NOMO1细胞、U-266 AR1细胞
NCIH3255细胞系相关产品:Hs-695-T细胞、Mel-624细胞、KMST6细胞
"