"COV434 Cells|人卵巢颗粒肿瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
HCT116/L细胞系相关产品:PANC 1005细胞、LAC细胞、U-2-OS细胞
H-4-II-E细胞系相关产品:8505C细胞、SNUC2A细胞、U-373-MG细胞
MDAMB157细胞系相关产品:MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
细胞生长:贴壁
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
COV434 Cells|人卵巢颗粒肿瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
SK-MEL3细胞系相关产品:D283MED细胞、MDA-MB231细胞、PaTu 8988s细胞
UCLA-SO-M14细胞系相关产品:C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
T-47-D细胞系相关产品:BTI-TN5B1-4细胞、Panc_08_13细胞、KMST6细胞
HCC-1428细胞系相关产品:BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞
细胞传代方法:1:2传代
以下对初次培养细胞人员来说,是非常好的开门教程:准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台;配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液);培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录);必须放在无菌间的设备:离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌:定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外灯照射;实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟;实验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台;实验人员的无菌准备:肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦净双手。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COV434 Cells|人卵巢颗粒肿瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
10T1/2细胞系相关产品:BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
RDES-1细胞系相关产品:HuT 78细胞、U-373-MG细胞、C-Lu-65细胞
Nb2-11细胞系相关产品:NCI-H2444细胞、L-363细胞、MFE 280细胞
NCIH838细胞系相关产品:MAVER1细胞、KMM-1细胞、NE-4C细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
Mo7e细胞系相关产品:H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞
BEL 7402细胞系相关产品:HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
Ketr3细胞系相关产品:HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
NCIH1648细胞系相关产品:NRK-49F细胞、Hs343T细胞、NS-1细胞
NCI-H1437细胞系相关产品:H2141细胞、MV 3细胞、KBM-7/Hap8细胞
D324细胞系相关产品:IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
IBRS2细胞系相关产品:DoTc2-4510细胞、NCI-H1092细胞、SW780细胞
SK-Col-1细胞系相关产品:H-1838细胞、NIE-115细胞、TYK-nu细胞
COV434 Cells|人卵巢颗粒肿瘤细胞系
NCI-H295R细胞系相关产品:OCI-LY-8细胞、MIA-PaCa-2细胞、NCI-H1954细胞
HA1800细胞系相关产品:HUSMC细胞、SUDHL-10细胞、K7M2-WT细胞
LAD-2细胞系相关产品:293FT细胞、PLC-PRF-5细胞、TB1 Lu细胞
PY8119细胞系相关产品:Lu-165细胞、LN382细胞、BC-022细胞
NCI-H2126细胞系相关产品:NCIH1651细胞、BNL-HCC细胞、H-441细胞
N-Tera-2细胞系相关产品:RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
SW 837细胞系相关产品:NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞
MDA2B细胞系相关产品:WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
HO1-N1细胞系相关产品:SU-DHL-8细胞、Dakiki细胞、YH-13细胞
HS578T细胞系相关产品:MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
SNU-1040细胞系相关产品:SCL-2细胞、MSC细胞、SW-1353细胞
FLC-7细胞系相关产品:B16 F10细胞、B95-8细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞
95C细胞系相关产品:BT474细胞、Lu-99A细胞、UO.31细胞
NCI-H1184细胞系相关产品:H748细胞、L363细胞、Hs 870.T细胞
NTERA-2 clone D1细胞系相关产品:NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
SNUC2A细胞系相关产品:A 549细胞、Panc_02_03细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞
B16细胞系相关产品:Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞
NCI-H2452细胞系相关产品:SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞
BE(2)M-17细胞系相关产品:P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞
A375SM细胞系相关产品:PBMC细胞、MKN-7细胞、SLMT1细胞
Molm14细胞系相关产品:CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞系相关产品:LIM 1215细胞、HMC-1细胞、HuH28细胞
OVCAR-4细胞系相关产品:WML2细胞、MBT2细胞、H-2591细胞
S3-HeLa细胞系相关产品:Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞
NOR10细胞系相关产品:NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞
Malme-3 M细胞系相关产品:KNS-62细胞、NS1-Ag 4/1细胞、SRS-82细胞
JURKAT E-61细胞系相关产品:MT-4细胞、WM-2664细胞、HNEpC细胞
CEMx721.174.T2细胞系相关产品:Tn5B1-4细胞、TE-13细胞、2BS细胞
MT-3 [Human leukocytes]细胞系相关产品:PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞
BEAS 2B细胞系相关产品:NTERA-2细胞、MM1.S细胞、NCI-HUT-125细胞
SW 403细胞系相关产品:NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
NCIN87细胞系相关产品:H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
NCIH841细胞系相关产品:C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
P3X63细胞系相关产品:GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
HeLa 229细胞系相关产品:NTERA-2cl.D1细胞、LS 180细胞、FRTL5细胞
SUM-52细胞系相关产品:AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞
SW 900细胞系相关产品:H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
Colon26细胞系相关产品:ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
LS 513细胞系相关产品:H292细胞、Molm14细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞
Hs821T细胞系相关产品:ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞
M-20细胞系相关产品:HCCC9810细胞、CAL148细胞、MUVEC细胞
MIMVEC细胞系相关产品:A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞
Hs 888Lu细胞系相关产品:Ramos 2G6 4C10细胞、KP2细胞、KYSE70细胞
2T细胞系相关产品:HEK-293A细胞、rUCMSCs细胞、NCM460细胞
SCI1细胞系相关产品:HC11 Mammary Epithelium细胞、SK-NSH细胞、PIGI细胞
Hs 706.T细胞系相关产品:NUGC4细胞、HCC1438细胞、HCC-1599细胞
MA-c细胞系相关产品:H69/P细胞、UMUC-3细胞、Alexander cells细胞
CW2细胞系相关产品:Epstein-Barr-2细胞、MJ细胞、HS 683T细胞
IEC 6细胞系相关产品:NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞
COLO-320HSR细胞系相关产品:UACC-812细胞、G-401细胞、NIH3T3细胞
COV434 Cells|人卵巢颗粒肿瘤细胞系
HDLM2细胞系相关产品:HT-115细胞、RD-ES细胞、LM2-4175细胞
OACP4C细胞系相关产品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、H774细胞、WI38细胞
Ketr-3细胞系相关产品:C42细胞、NCIH146细胞、KU-812F细胞
AC29细胞系相关产品:MES-SA Dx5细胞、CA-OV-3细胞、R 2 C细胞
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