"HCC1428 Cells|人乳腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
P3 (Jiyoye)细胞系相关产品:hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
J-774细胞系相关产品:IMR 90细胞、A9细胞、Rat-1细胞
SK-N-BE2细胞系相关产品:SNT8细胞、NCI-H676B细胞、SUM159细胞
细胞生长:贴壁
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
HCC1428 Cells|人乳腺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
SUP-B1细胞系相关产品:RPMI 7951细胞、Hep-G2细胞、SKLMS1细胞
C42细胞系相关产品:LUDLU-1细胞、1E8-H细胞、PLA 802细胞
SW579细胞系相关产品:Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
MKN45细胞系相关产品:TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞
细胞传代方法:1:4-1:8传代;每周换液2-3次。
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。传代细胞培养操作步骤:1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC1428 Cells|人乳腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长,偶尔上皮细胞液泡的形成
Hepatoma-22细胞系相关产品:NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品:HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞
SKMel-28细胞系相关产品:Line 207细胞、Hs 888.Lu细胞、A-498细胞
BEL7402细胞系相关产品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、2PK3细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
HEYA8细胞系相关产品:Hs675T细胞、SJRH30细胞、FET细胞
CEL细胞系相关产品:FCCH1024细胞、U266S细胞、H-2342细胞
NCI-SNU-449细胞系相关产品:MDA-MB-330细胞、D-341Med细胞、EOC20细胞
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品:H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞
KALS1细胞系相关产品:NCIH209细胞、2BS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞
CL-34细胞系相关产品:MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
RKO-E6细胞系相关产品:RetroPack PT67细胞、HMEL细胞、SF126细胞
CF Pac1细胞系相关产品:bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
HCC1428 Cells|人乳腺癌细胞系
BaF3细胞系相关产品:ECV304细胞、NCIH526细胞、H-1437细胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞系相关产品:NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞
MNNG/HOS细胞系相关产品:H2195细胞、Hs-852-T细胞、OCI-LY-3细胞
MPVECs细胞系相关产品:WM 239A细胞、PL-9细胞、Hs819.T细胞
NCI-H2110细胞系相关产品:E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞
CL1.0细胞系相关产品:COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞
LNCaP subline C4-2细胞系相关产品:Swiss3T3细胞、SK_HEP1细胞、CHO/dhFr-细胞
TALL1细胞系相关产品:VERO76细胞、293-H细胞、SHZ-88细胞
P-388细胞系相关产品:ACC-3细胞、SKNBE2细胞、HLF细胞
GLC-82细胞系相关产品:C2C12细胞、NCI-H292细胞、1E8-H细胞
IBRS-2细胞系相关产品:Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
Mink细胞系相关产品:ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞
Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品:HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞
NCIH23细胞系相关产品:mIMCD-3细胞、SUPM2细胞、U-118-MG细胞
LoVo细胞系相关产品:KYSE 270细胞、SNU878细胞、NCI-H1105细胞
Hs 766T细胞系相关产品:HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞
RBL-1细胞系相关产品:RBVEC细胞、Hs 604.T细胞、GM00215细胞
J 774A.1细胞系相关产品:Panc4.03细胞、SKCol1细胞、KBM-5细胞
RPMI no. 8226细胞系相关产品:BHT-101细胞、G292细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞
KOPN8细胞系相关产品:HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞
MZCRC1细胞系相关产品:PNT-1A细胞、YD15细胞、HLF-a细胞
RBVEC细胞系相关产品:OCI AML2细胞、HDLM2细胞、HBZY 1细胞
MNNG/HOS细胞系相关产品:H2195细胞、Hs-852-T细胞、OCI-LY-3细胞
Walker256细胞系相关产品:NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞
LNCaP-Clone-FGC细胞系相关产品:H1954细胞、3T6 Swiss Albino细胞、Tj-905细胞
CEM C7细胞系相关产品:NPC-TW 039细胞、A2008细胞、BeWo细胞
HNSC细胞系相关产品:HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
KMS-11细胞系相关产品:NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品:H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
MGSMC细胞系相关产品:WM 115细胞、Hs675细胞、16HBE14o-细胞
CCC-HIE-2细胞系相关产品:HEK293EBNA细胞、293 H细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞
RBL 1细胞系相关产品:DMS79细胞、NIH-OVCAR-3细胞、HeLa S-3细胞
H1963细胞系相关产品:SK Col 1细胞、GA-10 clone 4细胞、MCF-7/ADR细胞
HCC202细胞系相关产品:NKM1细胞、WEHI 164 TC细胞、SUDHL16细胞
PCI-4.2细胞系相关产品:CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞
ID8细胞系相关产品:IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞
8305C细胞系相关产品:MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞
SACC-LM细胞系相关产品:HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞
A-375SM细胞系相关产品:HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞
SupT1细胞系相关产品:HB611细胞、HCC1171细胞、H4-IIE-C3细胞
KMS-18细胞系相关产品:MALME.3M细胞、TCam 2细胞、HH [Human lymphoma]细胞
H2170细胞系相关产品:MBdSMC细胞、IM95细胞、MADB 106细胞
RC-K8细胞系相关产品:HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品:HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
SUM 190PT细胞系相关产品:LS174T细胞、HeLaS3细胞、NE-1细胞
H-2135细胞系相关产品:ROS17/28细胞、SKRC20细胞、Epstein-Barr-1细胞
H82细胞系相关产品:FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
H-128细胞系相关产品:NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞
Hs-606-T细胞系相关产品:SKES1细胞、NCIH1838细胞、LP-1细胞
CWR22R-V1细胞系相关产品:HLE-SRA-01/04细胞、NG-108-15细胞、CAL12T细胞
NCI-H524细胞系相关产品:DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
HCC1428 Cells|人乳腺癌细胞系
MX1细胞系相关产品:BXPC3细胞、K1细胞、ACC-M细胞
H9细胞系相关产品:8402细胞、TSCC1细胞、NCI-H2107细胞
NCI-SNU-449细胞系相关产品:MDA-MB-330细胞、OE21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
PIGI细胞系相关产品:SGC-996细胞、H-526细胞、Hs 888Lu细胞
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