检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗ATP1β3抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的ATP1β3会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GF-β1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗ATP1β3抗体与结合在包被抗体上的ATP1β3结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ATP1β3浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中ATP1β3的浓度。
产品名称:小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)ELISA试剂盒
英文名称:Mouse ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide(ATP1b3)ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:A106442
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)ELISA试剂盒标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)ELISA试剂盒Anti-T7 tag/HRP 辣根过化物酶标记T7 tag标签抗体IgG中性福尔马林固定液(10%)
phospho-Dnmt1(Ser154) 化DNA基转移酶1抗体白细胞介素8检测试剂盒含量:
phospho-Dnmt1(Ser732) 化DNA基转移酶1抗体白细胞介素1β检测试剂盒含量:
Anti-TFF3 /FITC 荧光素标记三叶肽因子3抗体IgG福尔马林-锌固定液(10%)
Anti-TFF2/FITC 荧光素标记三叶肽因子2抗体IgG福尔马林-化钠固定液(10%)
phospho-Dnmt1(Tyr399) 化DNA基转移酶1抗体肿瘤坏死因子α检测试剂盒含量:
phospho-Dnmt1(Tyr969) 化DNA基转移酶1抗体溶菌酶检测试剂盒含量:
Anti-TFPI/LACI /FITC 荧光素标记组织因子途径抑制剂抗体IgG福尔马林-钙固定液(10%)
Anti-TFPI-2/FITC 荧光素标记组织因子途径抑制剂-2抗体IgG-固定液(3:1)
Dnmt3a DNA基转移酶-3α抗体酰胆受体检测试剂盒含量:
Anti-TFR/CD71/FITC 荧光素标记转铁蛋白受体抗体IgG-固定液(3:1)
TAG1/CNTN2 瞬时表达轴索糖蛋白1抗体受体检测试剂盒含量:
Anti-CD72/Ly-32/FITC 荧光素标记CD72抗体IgG多聚溶液(10% PFA)
ADAM12/MLTN 去整合素样金属蛋白酶12抗体谷脱羧酶检测试剂盒含量:
注意事项:
1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。