抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、产品仅用于科研进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
参数规格:
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
英文名称 Anti-DKK1
中文名称 抑癌蛋白DKK1抗体
别 名 Dickkopf 1; Dickkopf 1 like; Dickkopf homolog 1; Dickkopf related protein 1; DKK 1; hDkk 1; hDkk1;DKK-1; SK.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 免疫学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 29kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DKK1
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.产品仅用于科研用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
下列是抑癌蛋白DKK1抗体 的相关热销产品:
美他环素英文名称:Metacycline保存:20℃,避光规格:100mg环指蛋白87
青霉英文名称:Penicillamine保存:20℃,避光规格:100mg环指蛋白44一抗
四环类杂质对照品英文名称:Tetracyclic impurity reference保存:20℃,避光规格:50mg环指蛋白86
利福平英文名称:Li Fuping保存:20℃,避光规格:150mg环指蛋白2一抗
环孢素英文名称:Cyclosporine保存:20℃,避光规格:100mg环指蛋白40一抗
头孢克洛δ3异构体英文名称:Cefaclor Delta 3 isomers保存:20℃,避光规格:50mg环指蛋白8一抗
头孢辛英文名称:Cefuroxime保存:20℃,避光规格:100mg细胞衰老抑制基因蛋白一抗
头孢辛英文名称:Cefuroxime axetil保存:20℃,避光规格:200mg中间丝相关蛋白一抗
舒他西林英文名称:Sultamicillin保存:20℃,避光规格:100mgras基因相关蛋白Rab24一抗
青V英文名称:Penicillin V保存:20℃,避光规格:100mg视黄醇脱氢酶10一抗
盐金英文名称:Aureomycin hydrochloride保存:20℃,避光规格:200mg核糖核酶6一抗
盐四环素英文名称:Tetracycline hydrochloride保存:20℃,避光规格:200mg化Ras特异性鸟嘌呤核苷释放因子1
土鳖虫(冀地鳖)英文名称:Woodlouse (Hebei Eupolyphaga sinensis)保存:20℃,避光规格:1g化视网膜母细胞瘤相关蛋白1一抗
溪黄草英文名称:Xihuang Herb保存:20℃,避光规格:0.5g化Rho相关蛋白激酶2一抗
鹿角英文名称:Antlers保存:20℃,避光规格:0.5g化G蛋白信号转导调节因子19一抗
五指毛桃英文名称:Radix Fici simplicissimae保存:20℃,避光规格:1g化Rad51一抗
海龙(尖海龙)英文名称:The Dragon (Jian Hailong)保存:20℃,避光规格:1g化核糖体S6激酶RSK2一抗
钙粘附蛋白8抗体Anhydrotuberosin中文名:别名:分子式:C20H16O4
钙粘蛋白15抗体Isotachioside中文名:别名:分子式:C13H18O8
X染色体开放阅读框21抗体Shikonofuran A中文名:紫草呋喃A别名:分子式:C18H20O5
9号染色体开放阅读框153抗体β-Tocopherol中文名:β-生育酚别名:分子式:C28H48O2
4号染色体开放阅读框19抗体(Z)-3-Hydroxy-5-methoxystilbene中文名:别名:分子式:C15H14O2
抑癌蛋白DKK1抗体 Alternaria brassicicola种属:Alternaria brassicicola
分离基物:荔枝。采集地:海南省海口市
提供形式:冻干粉
安全等级:1
模式菌株:no
培养方法
培养基:综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏水中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。
生长条件:25℃,好氧
生长特性菌株在25℃,综合PDA培养下菌落呈质地丝绒状,表面黑褐色。
存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法芸薹生链格孢(斜面)