"PLC/PRF/5:人肝癌亚力山大传代细胞
细胞背景资料:该细胞系分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)。 此细胞系原先被支原体污染,后用BM-cycline去除支原体
KMB 17细胞系相关产品:MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
MES-23.5细胞系相关产品:P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PLC/PRF/5:人肝癌亚力山大传代细胞
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞
HBE135-E6E7细胞系相关产品:WERIRb1细胞、NFS 60细胞、GalK1细胞
SNU-719细胞系相关产品:HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞
细胞传代方法:1:2传代
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PLC/PRF/5:人肝癌亚力山大传代细胞
细胞生长特性:贴壁生长
C28/I2细胞系相关产品:CHO/dhFr-细胞、Hos TE-85细胞、526 mel细胞
HCC-366细胞系相关产品:NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
Bac1 2F5细胞系相关产品:X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞
LCLC103H细胞系相关产品:CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞
细胞培养时分布不均匀,通常操作步骤:做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种,直接用100微升移液器吸取细胞悬液,沿孔壁(稍离开一点孔底即可,不要离底太高)直接接入,移液器不需完全打到,轻轻按下即可,每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用将每个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔依此类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好。培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后),先顺时针摇晃3次,马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。
HRVEC细胞系相关产品:CCK-81细胞、COLO_320DM细胞、L-6细胞
RIN Cl-5F细胞系相关产品:SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞
CAL12T细胞系相关产品:L6细胞、SEG1细胞、NCI H747细胞
TC-1 [Mouse lung]细胞系相关产品:Hs 274细胞、HuH-28细胞、NCIH2023细胞
C-4 I细胞系相关产品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、THP-1(ATCC)细胞、CCRF/CEM细胞
GL261细胞系相关产品:GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞
LSECs细胞系相关产品:NCI-H295细胞、QGY7701细胞、DHL10细胞
NL20细胞系相关产品:RIN m5F细胞、MLFC细胞、LTEP-sm 1细胞
FLS细胞系相关产品:Hs68细胞、PC10细胞、SNU484细胞
EBC-1/original细胞系相关产品:Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞
OCM-1细胞系相关产品:BV-173细胞、GM03320D细胞、Mv1.Lu细胞
JCA1细胞系相关产品:NCI-Hut 125细胞、Sp2/O细胞、H-64细胞
DLD1细胞系相关产品:AgC11x3A细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、Mahlavu细胞
HCC1008细胞系相关产品:HCC1588细胞、REC细胞、SNU-16细胞
H2106细胞系相关产品:RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞
KU 812细胞系相关产品:A9 (Hamprecht)细胞、SK-MEL-28细胞、SKUT-1细胞
KU 812细胞系相关产品:A9 (Hamprecht)细胞、SK-MEL-28细胞、SKUT-1细胞
Glioma 261细胞系相关产品:A431细胞、KYSE450细胞、WM 115细胞
526 mel细胞系相关产品:RTE细胞、293-EBNA细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞
NIH:OVCAR-10细胞系相关产品:RPTEC TERT1细胞、HONE-1细胞、MDA MB 175 VII细胞
NSI/1-Ag4-1细胞系相关产品:NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞
P3HR1细胞系相关产品:SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
NCI-H1385细胞系相关产品:TCCSUP细胞、H1703细胞、LYR细胞
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品:8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
MDA-MB-134VI细胞系相关产品:OCI-AML3细胞、LM-TK-细胞、NCI-H2087细胞
PLC/PRF/5:人肝癌亚力山大传代细胞
H-2073细胞系相关产品:Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞
VMCUB-1细胞系相关产品:Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞
DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
UMNSAH-DF-1细胞系相关产品:U343MG细胞、WM115mel细胞、VAESBJ细胞
hRPTC细胞系相关产品:PANC0504细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞、KCL-22细胞
CHOS细胞系相关产品:MCF 7细胞、HBE 135-E6E7细胞、TYKnu细胞
IMCD3细胞系相关产品:P560细胞、MKN-1细胞、NCI-H2052细胞
WM-266-mel细胞系相关产品:H2066细胞、SK-RC-39细胞、SPC-A1细胞
HO-8910PM细胞系相关产品:3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
P36细胞系相关产品:MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞
NCI-H1238细胞系相关产品:NCI-H1668细胞、BAC1.2F5细胞、SKMEL-31细胞
SW 962细胞系相关产品:OCI-Ly07细胞、MMAc.SF细胞、SNU-119细胞
SNU-251细胞系相关产品:NSC-34细胞、751-NA-15细胞、CPA 47细胞
SKMEL5细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞
211H细胞系相关产品:Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、TO175T细胞、HSC 3细胞
CHG5细胞系相关产品:BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞
GAK细胞系相关产品:RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞
P3X63Ag8细胞系相关产品:HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品:bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞
HEK.EBNA细胞系相关产品:NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞
IOSE 29细胞系相关产品:293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞
IOSE 29细胞系相关产品:293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞
QGY7701细胞系相关产品:U343细胞、CX1细胞、AM细胞
H-1651细胞系相关产品:A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞
Y3-Ag123细胞系相关产品:C4-1细胞、SK RC 20细胞、Hep-G2/C3A细胞
NTERA2细胞系相关产品:NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞
HCA7细胞系相关产品:CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞
Hs888T细胞系相关产品:C4 I细胞、LPC-H12细胞、GOS3细胞
C57 Mouse Tumor 93细胞系相关产品:Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞
Karpas422细胞系相关产品:CAL 12细胞、Hepa 1-6细胞、W133细胞
N2a细胞系相关产品:MPP89细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、SNU16细胞
A3细胞系相关产品:SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞
SUP-B1细胞系相关产品:RPMI 7951细胞、Hep-G2细胞、SKLMS1细胞
KOSC-2 cl3-43细胞系相关产品:Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
PLC/PRF/5:人肝癌亚力山大传代细胞
Ishikawa细胞系相关产品:C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
H-2227细胞系相关产品:HT1197细胞、SKNBE2C细胞、T-84细胞
LS 513细胞系相关产品:H292细胞、Reuber H-35细胞、NTERA2-cloneD1细胞
CAL12T细胞系相关产品:L6细胞、IB-RS2细胞、KMM-1细胞
Microbiological Associates-104细胞系相关产品:CHO-K1细胞、H-1954细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
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