NCI-H358细胞：人非小细胞肺癌细胞系

"NCI-H358细胞：人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：１９８１年从一位开始化疗之前的患者的肿瘤组织中分离建株。超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA。不表达SP-B和SP-C。他们在软琼脂中的克隆形成效率为０.８３%。
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁生长
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近３００种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题，并不是因为细胞消化最重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
PANC1005细胞系相关产品：H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞
CoCL2细胞系相关产品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品：SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
HEL-92细胞系相关产品：Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
A 72细胞系相关产品：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞
MG-63细胞系相关产品：TEV-1细胞、NRK-52E细胞、FK81细胞
Tb1.Lu细胞系相关产品：CPA47细胞、H-1869细胞、L363细胞
GP293细胞系相关产品：KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞
HCM细胞系相关产品：HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
KP-N-RT-BM-1细胞系相关产品：OCIAML3细胞、KAT5细胞、578T细胞
NIH-OVCAR-3细胞系相关产品：251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞
U-87MG细胞系相关产品：D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
Hs 27细胞系相关产品：TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞
WBF344细胞系相关产品：HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞
Madin Darby Bovine Kidney细胞系相关产品：LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
McG-1细胞系相关产品：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
RH-35细胞系相关产品：H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞
Mv.1.Lu细胞系相关产品：YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
SO-Rb 50细胞系相关产品：293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞
SCL-II细胞系相关产品：C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
OSK-1细胞系相关产品：REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞
A375-SM细胞系相关产品：RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
SkChA1细胞系相关产品：REC1细胞、H-146细胞、LU165细胞
MBT-2细胞系相关产品：HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞
293 c18细胞系相关产品：NCI-SNU-668细胞、HPAF-I细胞、A431/P细胞
HFL1细胞系相关产品：MC3T3细胞、COLO-684细胞、SKO-007细胞
LIPF178C细胞系相关产品：NEC8细胞、GM04154细胞、C41细胞
H-2085细胞系相关产品：BC-PAP细胞、GTL16细胞、NCTC 3960细胞
MGH-UI细胞系相关产品：ASH3细胞、Bovine Turbinate细胞、SK-MEL3细胞
MCF12A细胞系相关产品：EST50细胞、NCI-SNU-C2B细胞、GC-2细胞
LC-2/ad细胞系相关产品：TE-85 clone 5细胞、SDBMSC细胞、AG 9细胞
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L细胞：细胞
Hep G2细胞系相关产品：SKLU1细胞、NCI-H187细胞、C8166-CD4细胞
HCT 15细胞系相关产品：COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞
CP70细胞系相关产品：HUTU80细胞、HEL-92-1-7细胞、NCI-N87细胞
CP70细胞系相关产品：HUTU80细胞、HEL-92-1-7细胞、NCI-N87细胞
H6c7细胞系相关产品：Y-1细胞、253JB-V细胞、LL/2细胞
L-6细胞系相关产品：L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
FHCRC-11细胞系相关产品：Metastatic Variant-522细胞、SupT1细胞、NCI-H2227细胞
HBSMC细胞系相关产品：Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞
Huh-7细胞系相关产品：MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
Intestinal Epithelioid细胞： No. 18细胞系相关产品：Hx-147细胞、H510A细胞、NIH:OVCAR3细胞
L615细胞系相关产品：GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
293 EBNA细胞系相关产品：Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞
EFM-19细胞系相关产品：SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
74Int细胞系相关产品：RT-BM细胞、H-1581细胞、H6c7细胞
TM-3细胞系相关产品：LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
KYSE-70细胞系相关产品：HEK/293细胞、NCI-H82细胞、Nthy-ori 3.1细胞
NCI-128细胞系相关产品：SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
CAKI 2细胞系相关产品：RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞
KRC Y细胞系相关产品：L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
H-1688细胞系相关产品：MDA330细胞、LLC-PK-1细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞
Mink Lung细胞系相关产品：NCI-H1915细胞、HCC-44细胞、LNCaP clone FGC细胞
NCI-SNU-119细胞系相关产品：NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞
CNE-2Z细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞
Ra #1细胞系相关产品：PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞
NCIH838细胞系相关产品：MAVER1细胞、KMM-1细胞、NE-4C细胞
DHL10细胞系相关产品：H1793细胞、TB-1 Lu细胞、32D CL3细胞
Mo7e细胞系相关产品：H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞
CTV-1细胞系相关产品：P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
1301细胞系相关产品：L细胞：细胞、CoCL2细胞、PSN-1细胞
HSCT6细胞系相关产品：LSECs细胞、BI-Mel细胞、SVGp12细胞
HEK-293 c18细胞系相关产品：brain-derived Endothelial cells.3细胞、Caki2细胞、GES-1细胞
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
MCF-7/ADR-RES细胞系相关产品：PT67细胞、B16-F0细胞、MDAMB-231细胞
Porcine Kidney-15细胞系相关产品：PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品：HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
K7M2细胞系相关产品：GM03569D细胞、Pro-Lec1.3C细胞、NCI-H1092细胞
SUM-159-PT细胞系相关产品：Sp2/0-Ag-14细胞、P36细胞、OVCAR-8细胞
PC-3M-IE8细胞系相关产品：MDA-MB-231-GFP细胞、Balb/c3T3细胞、H1930细胞
Opossum Kidney细胞系相关产品：SK RC 52细胞、SGC 7901细胞、Panc8.13细胞
HOS TE85细胞系相关产品：tdott细胞、DH82细胞、TMK-1细胞
"