NCI-H358人非小细胞肺癌细胞

NCI-H358人非小细胞肺癌细胞

 细胞特性:

1981年从一位开始化疗之前的患者的肿瘤组织中分离建株。 超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构。细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA，不表达SP-B和SP-C。

1） 来源：细支气管及肺泡癌;非小细胞肺癌;肺;细支气管;肺泡

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1. 基本特性

来源：源自一名非吸烟女性肺腺癌患者的原发肿瘤组织，属于非小细胞肺癌（NSCLC）的腺癌亚型。

组织学特征：

表达腺癌标志物（如TTF-1、Napsin A）。

不表达鳞癌标志物（如p40、CK5/6）。

分子特征：

典型突变：

KRAS G12C突变（常见于吸烟相关肺癌，但该细胞系源自非吸烟患者，具有一定研究价值）。

CDKN2A缺失（与细胞周期调控异常相关）。

其他特征：

低表达EGFR，对EGFR-TKI（如吉非替尼）不敏感。

可能保留野生型TP53（需通过测序确认）。

2. 研究应用

KRAS靶向治疗：用于研究KRAS G12C抑制剂（如Sotorasib、Adagrasib）的敏感性和耐药机制。

代谢重编程：探索KRAS突变肿瘤的代谢依赖性（如谷氨酰胺代谢）。

免疫治疗研究：检测PD-L1表达水平，评估其对免疫检查点抑制剂的潜在响应。

药物组合筛选：测试KRAS抑制剂与MEK抑制剂（如Trametinib）或化疗药物的协同效应。

3. 培养要点

参数 条件 注意事项

培养基 RPMI-1640 + 10% FBS 需补充L-谷氨酰胺（2 mM）

传代比例 1:3至1:5（每周2-3次） 胰酶消化时间不宜过长

冻存方法 90% FBS + 10% DMSO 程序降温后液氮保存

污染防控 定期STR鉴定 避免与KRAS突变细胞系交叉污染

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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