NCI-H446细胞：人小细胞肺癌细胞系

"NCI-H446细胞：人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：该细胞是１９８２年由CarneyD和GazdarAF等从一位小细胞肺癌患者的胸腔积液中建立的。细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。这个细胞株是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种，表达神经元特有的烯醇酶和脑型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。与正常细胞相比，该细胞c-mycDNA序列扩增约２０倍，RNA增加１５倍。最初传代培养基用含有５%FBS的RPMI１６４０，另外添加１０nM化可的松、０.００５mg/ml胰岛素、０.０１mg/ml转铁
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁/悬浮生长，混合
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用，如细胞密度高于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞培养更好经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很好时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。
有关实验室细胞培养基知识普及：经典的培养基有很多种，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是应用最广泛的培养基。其他如M１９９、IMDM、L１５培养基等也用于某些细胞的培养；MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度；BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的４倍，采用双倍的HCO３-和CO２浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为１０００mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为４５００mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞；Ham’s F１２是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F１２还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养；RPMI １６４０培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
SuperTube细胞系相关产品：H1930细胞、TGW-I-nu细胞、LM6细胞
Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品：U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞
H.Ep. No. 2细胞系相关产品：RBL 2H3细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞、OVCAR8/ADR细胞
LC-1/sq细胞系相关产品：Panc 10.05细胞、Scott细胞、EC-GI细胞
HN6细胞系相关产品：HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞
CRFK细胞系相关产品：TCC-PAN2细胞、JVM3细胞、NCI.H522细胞
A253细胞系相关产品：RPE-hTERT细胞、ME16C细胞、LED-WiDr细胞
Fetal Rhesus Kidney-4细胞系相关产品：IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞
H-7721细胞系相关产品：TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞
Roswell Park Memorial Institute 1788细胞系相关产品：EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞
KP4细胞系相关产品：NS653细胞、F9细胞、VP229细胞
OAW42细胞系相关产品：EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞
1E8-H细胞系相关产品：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
NT2细胞系相关产品：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞
SKRC 39细胞系相关产品：JM1细胞、HOCF细胞、NCI H69细胞
SKRC 39细胞系相关产品：JM1细胞、HOCF细胞、NCI H69细胞
EU-4细胞系相关产品：FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
UWB1.289+BRCA1细胞系相关产品：Capan 1细胞、MDA-MB-435细胞、SUM149细胞
A-204细胞系相关产品：COLO 205细胞、P31/FUJ细胞、NCI H345细胞
293 H细胞系相关产品：RGC5细胞、NCI-H2291细胞、H-125细胞
786-0细胞系相关产品：NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞
SHEE细胞系相关产品：COLO320/DM细胞、SBC5细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞系相关产品：SK-MES1细胞、P3.653细胞、Human Embryonic Skin细胞
MPC11细胞系相关产品：GalK 1细胞、H1238细胞、CF-PAC1细胞
TGW-nu-1细胞系相关产品：Hep2细胞、SW 626细胞、SF-539 BT细胞
A498细胞系相关产品：H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞
BNL 1ME A.7R.1细胞系相关产品：HCC2218细胞、SW 1573细胞、COLO 684细胞
RPTEC/TERT1细胞系相关产品：PTK-2细胞、H1819细胞、NT2细胞
C3A细胞系相关产品：TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞
WM-266-mel细胞系相关产品：H2066细胞、SK-RC-39细胞、SPC-A1细胞
EAhy 926细胞系相关产品：SU86_86细胞、SK-MES-1细胞、huH 1细胞
KTC1细胞系相关产品：VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
LN299细胞系相关产品：Rat1细胞、ROS 17/28细胞、EB-1细胞
RH7777细胞系相关产品：KALS-1细胞、HCC-827细胞、NCI-128细胞
YAC-1细胞系相关产品：THLE-3细胞、Hu-P-T3细胞、THP 1细胞
HGE细胞系相关产品：Hs343T细胞、ECGI10细胞、A-2058细胞
ONS-76细胞系相关产品：3D4/21细胞、SC细胞、KRC Y细胞
Anip-973细胞系相关产品：D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞
SJSA-1细胞系相关产品：PECAPJ34细胞、HAC-84细胞、MDA.MB.435细胞
MA-104细胞系相关产品：Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞
PTK-2细胞系相关产品：MHCC97L细胞、SUDHL-1细胞、Ramos (RA 1)细胞
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
PF-382细胞系相关产品：HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞
A10细胞系相关产品：SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞
Hs695细胞系相关产品：NB4细胞、C-33-A细胞、M109细胞
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品：bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞
PGLH7细胞系相关产品：CHL-11细胞、293 EBNA细胞、OACP4C细胞
SW839细胞系相关产品：RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞
HSAS3细胞系相关产品：PE/CA-PJ-34细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞、HUTU80细胞
RGC-6细胞系相关产品：RPMI7666细胞、RKO-AS45-1细胞、RCC10 RGB细胞
SuDHL 10细胞系相关产品：Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞
H-2087细胞系相关产品：PL-12细胞、NIH/3T3细胞、MDA-MB-453细胞
MC 3T3-E1细胞系相关产品：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞
SKNBE2细胞系相关产品：PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞
S.B.细胞系相关产品：BEL7402细胞、HEK-293-EBNA细胞、DU 145细胞
L- cell细胞系相关产品：UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
GBC-SD细胞系相关产品：Alexander细胞、Hx-147细胞、PL5细胞
MUS-M1细胞系相关产品：KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞
Mono-Mac-6细胞系相关产品：KP-N-NS细胞、OSA细胞、P 815细胞
CAL51细胞系相关产品：MDA-MB231细胞、HEK/293细胞、HSC细胞
U-373 MG细胞系相关产品：L-132细胞、Huh7.5.1细胞、GS9L细胞
Mel526细胞系相关产品：LC-MS细胞、KCL-22细胞、KRC/Y细胞
Jurkat E6.1细胞系相关产品：H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞
SNU5细胞系相关产品：NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞
L929细胞系相关产品：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
SNU-1040细胞系相关产品：SCL-2细胞、MSC细胞、SW-1353细胞
Hs445细胞系相关产品：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞
TE-32细胞系相关产品：P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞
U266细胞系相关产品：MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞
TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：NCI-H2106细胞、MGECs细胞、PT-K75细胞
JB6 Cl 30细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、HSC2细胞、Hs604T细胞
HCC 70细胞系相关产品：Nthy-ori 3-1细胞、NCI-H82细胞、RAW 264.7细胞
X63-Ag8细胞系相关产品：E6-1细胞、COLO 699细胞、LLCMK2细胞
"