NCI-H446人小细胞肺癌细胞

NCI-H446人小细胞肺癌细胞

 细胞特性:

NCI-H446 [H446]细胞是在1982年从一名患有肺小细胞癌的61岁白人男性患者的胸膜液中分离出来的。原发肿瘤的形态不是小细胞肺癌的特征。

1） 来源：肺；转移灶：肋膜渗出癌；小细胞肺癌

2） 形态：上皮细胞样 贴壁生长 少量悬浮

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用。

1. 细胞系背景

来源：源自一名小细胞肺癌（SCLC）患者的骨髓转移灶（1982年建立），属于 高侵袭性 亚型。

组织学类型：小细胞肺癌（SCLC），具有 神经内分泌特征（表达突触素、嗜铬粒蛋白A等）。

临床关联：SCLC占肺癌的10-15%，与吸烟强相关，NCI-H446是研究其快速进展和转移的常用模型。

2. 关键分子特征

神经内分泌标志物：

Chromogranin A（CgA）、Synaptophysin（Syn）、CD56（NCAM） 阳性。

ASCL1（Achaete-scute homolog 1） 高表达（SCLC核心转录因子）。

遗传变异：

TP53 和 RB1 双缺失（SCLC典型特征，>90%病例）。

MYC家族 扩增（如MYC、MYCN，与化疗耐药相关）。

增殖特性：

高增殖率（倍增时间约24-36小时），体外易形成悬浮或半贴壁细胞簇。

3. 研究应用

化疗耐药机制：

研究 铂类（顺铂） 或 依托泊苷 耐药机制（如ABC转运体过表达、DNA修复激活）。

靶向治疗探索：

测试DLL3靶向药物（如Rovalpituzumab tesirine）或PARP抑制剂（奥拉帕利）。

转移模型：

构建 脑或肝转移 异种移植模型（SCLC常见转移部位）。

神经内分泌调控：

研究Notch信号通路抑制对神经内分泌分化的影响。

4. 培养条件

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗（青霉素/链霉素）。

生长特性：

半贴壁/悬浮生长，部分细胞贴壁后易脱落，需轻柔吹打传代。

培养时可观察到大细胞簇（可能与肿瘤干细胞特性相关）。

冻存：90% FBS + 10% DMSO，程序降温后液氮保存。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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