Granta-519 人类B细胞淋巴癌细胞系

"Granta-519 人类B细胞淋巴癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
Granta-519 人类B细胞淋巴癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
Granta-519 人类B细胞淋巴癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SuDHL 10细胞系相关产品：Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞 
PC 61 5.3细胞系相关产品：NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞 
TE-32细胞系相关产品：P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞 
CNE-1细胞系相关产品：HPBALL细胞、SUSM1细胞、IA-LM细胞 
SK-RC-20细胞系相关产品：CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞 
293E细胞系相关产品：INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞 
CG4细胞系相关产品：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞 
NCI-H1437细胞系相关产品：H2141细胞、MV 3细胞、KBM-7/Hap8细胞 
138 MG细胞系相关产品：HCC-9724细胞、A-204细胞、C2BBe1细胞 
A549 ATCC细胞系相关产品：ECC1细胞、NCI-H2023细胞、NCIH2122细胞 
Hs 343.T细胞系相关产品：TN5B14细胞、HKC细胞、V79-1细胞 
PLC细胞系相关产品：Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞 
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品：UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞 
N2a细胞系相关产品：MPP89细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、SNU16细胞 
NCIH1436细胞系相关产品：RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞 
NE-1细胞系相关产品：159 PT细胞、MGC803细胞、HSC-6细胞 
P30/Ohkubo细胞系相关产品：OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞 
NCI-SNU-16细胞系相关产品：IHH细胞、NTERA-2细胞、T98细胞 
M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品：NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞 
NCI-SNU-C1细胞系相关产品：SH-SY5Y细胞、HeLa S3细胞、PC-9/GR细胞 
Granta-519 人类B细胞淋巴癌细胞系
MM1S细胞系相关产品：L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞 
CAL33细胞系相关产品：RPMI-1846细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、F-81细胞 
OCI-Ly01细胞系相关产品：Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞 
NCI-H2110细胞系相关产品：E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞 
Calu6细胞系相关产品：Ra #1细胞、RPMI8402细胞、HEK-A细胞 
MGC803细胞系相关产品：A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞 
GC-1spg细胞系相关产品：SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞 
SP2-0-Ag14细胞系相关产品：KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞 
Z138细胞系相关产品：NCI-H520细胞、HeLa 229细胞、KATOIII细胞 
C33细胞系相关产品：2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞 
PT67细胞系相关产品：CWR22Rv1细胞、OCILY3细胞、CCD841CoN细胞 
YT细胞系相关产品：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞 
Vero-76细胞系相关产品：Jurkat Clone E6-1细胞、KMS26细胞、NCIH1694细胞 
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品：8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞 
RPMI-6666细胞系相关产品：SKG3A细胞、MC-116细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞 
Panc_08_13细胞系相关产品：CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞 
HEK 293 c18细胞系相关产品：HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞 
H1954细胞系相关产品：Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞 
SNU398细胞系相关产品：G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞 
Colon26细胞系相关产品：ABE­8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞 
RBL-2H3细胞系相关产品：EFM192B细胞、KB细胞、C4-2 Bone metastatic细胞 
alphaTC clone 6细胞系相关产品：L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞 
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞 
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞 
HDF-a细胞系相关产品：MDA-330细胞、HCC-38细胞、MILE SVEN 1细胞 
RIN-m细胞系相关产品：MOLM-13细胞、DMS 53细胞、BMU-S1细胞 
HFF1细胞系相关产品：BNL 1ME A.7R.1细胞、MB39细胞、H295R-S1细胞 
OCI-LY-19细胞系相关产品：CCD-18Co细胞、A-427细胞、NCIH2452细胞 
MHCC-LM3细胞系相关产品：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞 
IOSE80细胞系相关产品：NCI-H69C细胞、Jurkat E6-1细胞、MGECs细胞 
SHEE细胞系相关产品：COLO320/DM细胞、SBC5细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞 
H1703细胞系相关产品：DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞 
Hela-mock细胞系相关产品：LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞 
SW-982细胞系相关产品：LADMAC细胞、C4I细胞、YD-38细胞 
hTERT RPE-1细胞系相关产品：QGY-7703细胞、CCRFCEM细胞、G519细胞 
OP-9细胞系相关产品：MADB-106细胞、RERF-LCMS细胞、Y3-Ag1.2.3细胞 
KBM-7细胞系相关产品：KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞 
GM17219细胞系相关产品：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞 
CoCL3细胞系相关产品：H1355细胞、H2228细胞、T-ALL1细胞 
PIG1细胞系相关产品：L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞 
CHO-K1细胞系相关产品：V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞 
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NCI-H2009细胞系相关产品：CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞 
HTori3细胞系相关产品：GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞 
Fox/NY细胞系相关产品：ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞 
H-2171细胞系相关产品：H-2030细胞、MO59J细胞、HIT T-15细胞 
GA10细胞系相关产品：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞 
WM-239细胞系相关产品：C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞 
CA 46细胞系相关产品：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞 
GM06141细胞系相关产品：RBL-I细胞、THP 1细胞、NCI N87细胞 
mIMCD-3细胞系相关产品：NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞 
HS5细胞系相关产品：huH 1细胞、SK-MES-1细胞、Clone 929细胞 
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、SK-MEL28细胞、IPAM-WT细胞 
TE-32细胞系相关产品：P3-Jiyoye细胞、Hepatoma 22细胞、IPEC-1细胞 
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