GRANTA519人淋巴癌细胞

GRANTA519人淋巴癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:58 岁，女性

组织来源:外周血

生长特性:悬浮生长

细胞形态:淋巴母细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:DMEM + 10%h.i. FBS

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

来源与病理特征：

组织来源：源自人套细胞淋巴瘤（Mantle Cell Lymphoma, MCL），具有 t(11;14)(q13;q32)易位 导致 CCND1（cyclin D1）过表达 的典型特征。

分子特征：

遗传变异：CCND1-IgH融合基因（FISH验证），常见伴随TP53突变（约20-30%病例）及ATM缺失。

免疫表型：CD19+、CD20+、CD5+（MCL标志），SOX11+（高侵袭性亚型标记）。

培养特性：

悬浮生长，细胞呈球形，聚集成松散团块，增殖速度中等（倍增时间约36-48小时）。

需定期换液（每3-4天）避免代谢废物堆积。

临床相关性

MCL研究的黄金模型，尤其适用于 BTK抑制剂（如伊布替尼）耐药机制研究。

2. 核心科研应用：

转化医学研究

靶向治疗：

测试 BCL-2抑制剂（维奈托克）与BTK抑制剂的协同效应（依赖BCL-2表达水平）。

研究CDK4/6抑制剂（如帕博西尼）对CCND1驱动的细胞周期阻滞作用。

耐药机制：

分析PLCγ2突变或CXCR4过表达介导的伊布替尼耐药。

通过CRISPR筛选耐药相关非编码RNA（如lncRNA MALAT1）。

疾病模型

PDX模型：NSG小鼠尾静脉注射模拟淋巴瘤播散（需监测脾脏/骨髓浸润）。

3D共培养：与基质细胞（如HS-5）构建肿瘤微环境模型。

3. 培养与质控标准：

标准化操作

培养基：RPMI-1640 + 15% FBS + 1% GlutaMAX + 1%丙酮酸钠（适应高代谢需求）。

传代要点：

轻柔离心（300g, 5分钟）后重悬，无需消化，传代比例1:3至1:4。

维持密度在5×10?–8×10? cells/mL（避免过度拥挤）。

冻存：冻存液含10% DMSO + 90% FBS，程序降温后液氮保存。

质控节点

分子验证：

季度检测CCND1-IgH融合基因（FISH/qPCR）及STR分型（比对DSMZ数据库）。

功能检测：

流式验证CD5/CD19共表达（＞95%为合格）。

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。