CCD-33Co 人结肠成纤维细胞系

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细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：成纤维细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CCD-33Co 人结肠成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
CCD-33Co 人结肠成纤维细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H1694细胞系相关产品：beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞 
RS(4;11)细胞系相关产品：Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞 
MSF细胞系相关产品：H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞 
B78细胞系相关产品：RPMI6666细胞、SW-1783细胞、ASH3细胞 
HEK 293 c18细胞系相关产品：HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞 
C4-2细胞系相关产品：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞 
TF1细胞系相关产品：NB1-RGB细胞、SHEP1细胞、BetaTC6细胞 
FO [Mouse myeloma]细胞系相关产品：P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞 
HIC细胞系相关产品：hA549细胞、GP2d细胞、SF 763细胞 
ECV304细胞系相关产品：H82细胞、3T3L1细胞、GOS-3细胞 
NCI-H596细胞系相关产品：MDCK supertube细胞、Vero C1008细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞 
SW1353细胞系相关产品：GP293细胞、L5178Y细胞、CAL-51细胞 
Hs895T细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、SK-N-AS细胞、MOLP2细胞 
PNT1A细胞系相关产品：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞 
BIC-1细胞系相关产品：BALB/c 3T3 clone A31细胞、SW-756细胞、ONS76细胞 
NK-92细胞系相关产品：WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞 
NK-92细胞系相关产品：WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞 
CORL23细胞系相关产品：DoTc2细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞、RF/6A细胞 
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞 
NCIH2172细胞系相关产品：MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞 
CCD-33Co 人结肠成纤维细胞系
ARH-77细胞系相关产品：RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞 
NCIH2126细胞系相关产品：GM05862细胞、H1954细胞、HS-766T细胞 
HCC-94细胞系相关产品：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞 
PF-382细胞系相关产品：HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞 
H-1650细胞系相关产品：IPLB-SF 21细胞、DAKIKI Clone 1细胞、U 266细胞 
Vero-E6细胞系相关产品：LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞 
LCLC103H细胞系相关产品：CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞 
SUM-52细胞系相关产品：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞 
KYSE-270细胞系相关产品：MCA 38细胞、NCI-H2108细胞、GM02132C细胞 
IFRS1细胞系相关产品：SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞 
HS578细胞系相关产品：CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞 
HeLa-229细胞系相关产品：HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞 
BC-009细胞系相关产品：MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞 
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞 
Hs852细胞系相关产品：FDCP1细胞、OCI-AML4细胞、PC-3M细胞 
MLMEC细胞系相关产品：U-266细胞、GDM-1细胞、HuT-78细胞 
TKB-1细胞系相关产品：Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞 
MDA-231细胞系相关产品：HOS(TE85)细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞、OC 316细胞 
U-87细胞系相关产品：LLC-WRC 256细胞、TE-12细胞、McArdle RH-7777细胞 
SNU-C2B细胞系相关产品：MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞 
BC-3H-1细胞系相关产品：H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞 
Ball 1细胞系相关产品：KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞 
NCIH1573细胞系相关产品：CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞 
HEK-293细胞系相关产品：Ramos 2G6.4C10细胞、OCI-Ly19细胞、NPA'87细胞 
WM-451Lu细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-1666细胞、LN-18细胞 
RKO_AS45细胞系相关产品：NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞 
NK10a细胞系相关产品：HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞 
BE(2)-M17细胞系相关产品：H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞 
Hi-5细胞系相关产品：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞 
TM4细胞系相关产品：UC-3细胞、CWR22R-V1细胞、TE-11细胞 
FU-OV-1细胞系相关产品：NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞 
H-220细胞系相关产品：Cor L51细胞、SV-HUC-1细胞、PK 15细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞系相关产品：HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞 
PIGI细胞系相关产品：GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞 
AM细胞系相关产品：HFLS-RA细胞、GLC-15细胞、HO1N1细胞 
PLC PRF 5细胞系相关产品：RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞 
Michigan Cancer Foundation-10A细胞系相关产品：ST486细胞、VP303细胞、3T3-J2细胞 
RD-2细胞系相关产品：Hs 675.T细胞、MDA453细胞、MES-13细胞 
143BTK-细胞系相关产品：H9细胞、NCIH1770细胞、HCEC细胞 
NK-92MI细胞系相关产品：SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞 
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LTEP-sm细胞系相关产品：NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞 
KYSE-50细胞系相关产品：Hs604T细胞、Calu 3细胞、SW 620细胞 
130 T细胞系相关产品：H2106细胞、3396细胞、MDAMB231细胞 
293 Ad5细胞系相关产品：MO59J细胞、639V细胞、NCIADR.RES细胞 
CMECs细胞系相关产品：H-1573细胞、JHH2细胞、mREC细胞 
QGP-1细胞系相关产品：BALB 3T3 clone A31细胞、HSC-1细胞、JB6 Cl 30细胞 
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞 
HPDLF细胞系相关产品：HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞 
PLC-PRF-5细胞系相关产品：NCIH345细胞、DU 4475细胞、207细胞 
KASUMI1细胞系相关产品：9L细胞、Daoy细胞、3T3-A31细胞 
HCCLM3细胞系相关产品：HAEC细胞、NK92-MI细胞、HOP 92细胞 
MSF细胞系相关产品：H2227细胞、AN-3细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞 
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