BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞系

"BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞背景资料：胚胎；成纤维；自发永生；雄性；BALB/c 
细胞形态：成纤维细胞样 
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
HEL-1细胞系相关产品：SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞 
MKN74细胞系相关产品：AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞 
A549ATCC细胞系相关产品：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞 
F-81细胞系相关产品：BIC细胞、WM266细胞、X63细胞 
MV4:11细胞系相关产品：P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞 
MESSA-DX5细胞系相关产品：GLC-15细胞、PLA801D细胞、OCI-AML2细胞 
SK 1细胞系相关产品：Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞 
SCCVII/St细胞系相关产品：Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞 
Ect1/E6E7细胞系相关产品：NIH-3T3-L1细胞、H-676B细胞、End1/E6E7细胞 
H1092细胞系相关产品：MM134细胞、C166细胞、MCF/Adr细胞 
IEC 6细胞系相关产品：NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞 
MLFC细胞系相关产品：Murine Carcinoma-38细胞、Karpas422细胞、MM1细胞 
SMA-560细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、801-D细胞、Tu-686细胞 
MDA175细胞系相关产品：SK-MEL28细胞、HN6细胞、MDA-MB-435细胞 
GM03320细胞系相关产品：SK.OV.3细胞、675T细胞、L-02细胞 
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞 
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞 
NCIH2291细胞系相关产品：Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞 
QSG-7701细胞系相关产品：SW 626细胞、Y3-Ag1.2.3细胞、RPTC细胞 
HCC-2279细胞系相关产品：HPAEC细胞、UMRC2细胞、UO31细胞 
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞系
OE21细胞系相关产品：NCI-H508细胞、ECV304细胞、H64细胞 
Natural Killer-92细胞系相关产品：BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞 
RN-c细胞系相关产品：BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞 
SW626细胞系相关产品：XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞 
H810细胞系相关产品：C-6细胞、L-929细胞、SW 756细胞 
MFE 296细胞系相关产品：SK UT 1细胞、RPMI-7666细胞、NCI-SNU-1040细胞 
SMA560细胞系相关产品：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞 
KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞 
MUS-M1细胞系相关产品：KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞 
GC-1细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞 
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞 
NOR-10细胞系相关产品：ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞 
MES-SA Dx5细胞系相关产品：Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞 
B16 melanoma细胞系相关产品：As-PC1细胞、End1/E6E7细胞、H889细胞 
TE5细胞系相关产品：MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞 
AN3细胞系相关产品：Kasumi 1细胞、alpha TC1 clone 6细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞 
C4-1细胞系相关产品：IOSE80UBC细胞、HeLa S 3细胞、COR-L88细胞 
JeKo 1细胞系相关产品：HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞 
NCI-H1793细胞系相关产品：Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞 
SKNBE-2细胞系相关产品：Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞 
H-711细胞系相关产品：GM03570细胞、SNK1细胞、NIT-1细胞 
AR4-IP细胞系相关产品：S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞 
hOMF细胞系相关产品：Nthy ori 3.1细胞、JM-1细胞、OV 2008细胞 
RKO细胞系相关产品：WM451Lu细胞、SKML-28细胞、HSC（Human Schwann）细胞 
HCA7细胞系相关产品：CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞 
Helacyton gartleri细胞系相关产品：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞 
CEM-C7细胞系相关产品：CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞 
DR2R 1610细胞系相关产品：GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞 
NCIH1581细胞系相关产品：H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞 
T47-D细胞系相关产品：L 1210细胞、EFM-19细胞、CAL 33细胞 
C-28/I2细胞系相关产品：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞 
143B TK-细胞系相关产品：GM03571细胞、MH-22a细胞、SK RC 52细胞 
LNCaP-Clone-FGC细胞系相关产品：H1954细胞、3T6 Swiss Albino细胞、Tj-905细胞 
RKO-AS45-1细胞系相关产品：HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞 
GalK 1细胞系相关产品：Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞 
HAC-84细胞系相关产品：Panc-3_27细胞、KNS62细胞、Hs-729-T细胞 
ZR-75-30细胞系相关产品：EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞 
Alexander cells细胞系相关产品：HEK 293 c18细胞、M2-10B4细胞、CAL 85-1细胞 
CCD18Co细胞系相关产品：HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞 
T1-73细胞系相关产品：PM6细胞、C12细胞、CL MC/9细胞 
Sp2/mIL-6细胞系相关产品：MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞 
BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纤维细胞系
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品：OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞 
Panc-813细胞系相关产品：IA-LM细胞、PCI:SG-231细胞、OE-19细胞 
alpha-TC1.6细胞系相关产品：Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞 
NBL-4细胞系相关产品：UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞 
BNL 1MEA.7R.1细胞系相关产品：CHO K1细胞、SF17细胞、NCTC 1469细胞 
CL 1-5细胞系相关产品：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞 
NCIH1355细胞系相关产品：HMSC细胞、D341细胞、T. T细胞 
IOSE29细胞系相关产品：C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞 
Hs870T细胞系相关产品：JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞 
SW 527细胞系相关产品：UMUC-3细胞、MHCC-97细胞、OAW 42细胞 
SUNE-1细胞系相关产品：D10G41细胞、Colo741细胞、293T/17细胞 
A549ATCC细胞系相关产品：H-1435细胞、BIC细胞、H1184细胞 
"