BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞

产品信息：

种属:小鼠

生长特性:贴壁细胞

细胞形态:成纤维细胞样

冻存条件:冻存液： 无血清非程序冻存液

温度：液氮

培养方案A（默认）:生长培养基：DMEM+10% FBS +1% P/S

培养条件：气相：空气，95%；CO?，5%, 温度：37℃

推荐传代比例:1:2-1:3

推荐换液频率:2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述:BALB/3T3 clone A31细胞是由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年从裂解的14-17天的BALB/c小鼠胚胎中建立的几株细胞之一。BALB/3T3 clone A31细胞对接触抑制特别敏感，生长需高倍数稀释，饱和浓度低。此外，BALB/3T3 clone A31细胞对癌基因DNA病毒SV40和小鼠肉瘤病毒高度易感。

年龄（性别）:14-17FD;Sex unspecified

组织来源:胚胎；成纤维细胞

细胞类型:自发永生化细胞

生物安全等级:BSL-1

保藏机构:ATCC; CCL-163 ECACC; 86110401

培养操作要点

培养体系与条件：

基础培养基为DMEM（含高糖），添加10%胎牛血清（FBS）、1%双抗（青链霉素），培养条件为37℃、5% CO?、95%空气，湿度70%-80%。

注意：培养基pH敏感，建议使用含1.5 g/L碳酸氢钠的DMEM，并避免频繁换液（每2-3天换液一次）。

传代操作：

细胞密度达80%-90%时传代，消化液为0.25%胰酶（可加0.53 mM EDTA），消化时间2-10分钟（随培养时间延长而增加），显微镜下观察细胞变圆、间隙增大时终止消化。

传代比例1:2至1:4（初次建议1:2），离心收集细胞后重悬接种新瓶。

难消化时采用分次消化法：首次消化3-5分钟后收集悬浮细胞，剩余贴壁细胞继续消化至脱落。

形态与生长特性：

贴壁生长，形态多样：低密度时呈不规则或梭形，高密度时（≥80%）呈规则纤维状或“鹅卵石”样单层排列。

增殖偏慢，倍增时间约26-30小时，培养过程中可能出现10%活漂浮细胞及碎片，属正常现象，建议保留漂浮细胞。

常见问题处理：

形态异常：多因密度过低，建议高密度传代（铺满瓶底）3。

消化困难：严格控制消化时间，轻柔吹打，避免机械损伤；培养基颜色偏紫（碱性）时及时换液。

代次影响：细胞超过30代后，部分分子表达（如VCAM-1、MAdCAM-1）下降，建议使用低代次细胞（≤30代）。

应用与注意事项

应用方向：适用于血脑屏障模型构建、神经毒性研究、血管新生实验（如Transwell迁移、管腔形成实验）及药物靶向递送测试。

关键提醒：

细胞对温度和pH敏感，培养基复温4小时以上再使用。

收到细胞后需立即消毒、静置，并检查密度与贴壁情况，按需传代或复苏。

生物安全等级为BSL-1或2，仅限科研使用。

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