CL-40 人结肠癌细胞系

"CL-40 人结肠癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CL-40 人结肠癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
贴壁细胞传代实验准备事项：将15mL离心管、T25细胞培养瓶、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用。贴壁细胞传代实验步骤：将准备好的培养基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；从培养箱中取出待处理的细胞，在显微镜下观察细胞状态；用酒精消毒培养瓶，放入安全柜中；轻轻吸去细胞上清；加入2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，轻轻晃匀、覆盖所有细胞后，置于37℃培养箱静置消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；按比例将细胞悬液分装至培养瓶中；在显微镜下观察传代后的细胞密度及状态；将培养瓶放入培养箱中培养。注意事项：培养过程中需维持细胞处于对数生长期，80%左右即可传代，传代比例请参照说明书建议；消化时间不宜过长，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，难消化的细胞可分次消化，每次时间不超过5min；培养过程中需要定期换液，一般细胞建议2~3天换液一次。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
CL-40 人结肠癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
ST 486细胞系相关产品：HCEC-B4G12细胞、KLN 205细胞、BMF细胞 
PLB 985细胞系相关产品：SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞 
Hs895.T细胞系相关产品：BMU-S1细胞、D10细胞、H1395细胞 
Neuro2a细胞系相关产品：DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞 
HUV-EC-C细胞系相关产品：B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞 
Sp2/0-Ag14细胞系相关产品：SUDHL5细胞、OCI-Ly 8细胞、CEMO-1细胞 
NCI-H196细胞系相关产品：NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞 
Hs 940.T细胞系相关产品：CoC1细胞、TE10细胞、MEF (CF-1)细胞 
H-526细胞系相关产品：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞 
BAR-T细胞系相关产品：HEK-293F细胞、H22-H8D8细胞、CWR-22rv1细胞 
SJ-RH30细胞系相关产品：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞 
H-2227细胞系相关产品：HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞 
BCP1细胞系相关产品：M4e细胞、SK-CO-1细胞、IOSE29细胞 
MCA 38细胞系相关产品：MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞 
L 363细胞系相关产品：WEHI 3B细胞、MDCK.2细胞、LU451细胞 
McA-RH8994细胞系相关产品：LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞 
McA-RH8994细胞系相关产品：LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞 
H2030细胞系相关产品：Molm14细胞、CALU1细胞、L 1210细胞 
3-LL细胞系相关产品：CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞 
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞 
CL-40 人结肠癌细胞系
SUM 52PE细胞系相关产品：OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞 
SW-1990细胞系相关产品：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞 
P388D1细胞系相关产品：MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞 
Kasumi-6细胞系相关产品：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞 
3T3NIH细胞系相关产品：LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞 
MIA-PaCa-2细胞系相关产品：Dakiki细胞、HSC3细胞、HCPEpiC细胞 
Lec1细胞系相关产品：ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞 
NCIH740细胞系相关产品：95C细胞、NCI-H3255细胞、CCC-HHM-2细胞 
JM-1细胞系相关产品：RPMI No. 1846细胞、Clone Y-1细胞、H7721细胞 
Rin-M-5F细胞系相关产品：HuP-T3细胞、HCC-1806细胞、EOC-20细胞 
BEL-7404细胞系相关产品：CO115细胞、RPMI.8226细胞、High5细胞 
LNCaP-FGC细胞系相关产品：CORL26细胞、NCI-H250细胞、RA 1细胞 
SW-1990细胞系相关产品：H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞 
IAR20细胞系相关产品：SW 1222细胞、WIL2-S细胞、NCIH1573细胞 
HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞 
RWPE-2细胞系相关产品：C 643细胞、SF-539细胞、NT2D1细胞 
HOC-1细胞系相关产品：SCC 25细胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、H-2023细胞 
SW1990细胞系相关产品：SNU1040细胞、CACO2细胞、C-4I细胞 
Madin-Darby Canine Kidney细胞系相关产品：U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞 
P3X63Ag8.653细胞系相关产品：SW 48细胞、CMT-167细胞、Beta-TC-6细胞 
MLM细胞系相关产品：NCI-H1581细胞、NPA-87细胞、GM03320D细胞 
Swiss/3T3细胞系相关产品：Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞 
Ramos(RA1)细胞系相关产品：IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞 
OCI AML2细胞系相关产品：MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞 
OVCA-420细胞系相关产品：RIN-m5F细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞、Pa14C细胞 
WM 239A细胞系相关产品：WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞 
MKN74细胞系相关产品：AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞 
OVCA432细胞系相关产品：KU 19-19细胞、REC-1细胞、H-838细胞 
Hs729细胞系相关产品：Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞 
SK-MEL-31细胞系相关产品：CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞 
Jurkat77细胞系相关产品：HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞 
Hs 604.T细胞系相关产品：H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞 
IOSE-80细胞系相关产品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、LO2细胞、H1781细胞 
HOPC细胞系相关产品：UACC-893细胞、Normal Rat Kidney细胞、H209细胞 
HT-1080细胞系相关产品：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞 
CDC/EU.HMEC-1细胞系相关产品：NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞 
NS1细胞系相关产品：H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞 
Panc327细胞系相关产品：KPL-1细胞、BEL-7402细胞、COLO-320HSR细胞 
G361-mel细胞系相关产品：KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞 
MH-S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、PC12(高分化)细胞、KE39细胞 
NCI-H2073细胞系相关产品：Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞 
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NOZAWA细胞系相关产品：ME180细胞、NCI-SNU-878细胞、HepaRG细胞 
Karpas-299细胞系相关产品：HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞 
H647细胞系相关产品：DMS-273细胞、FRhK4细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞 
Mono-Mac-1细胞系相关产品：ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞 
HSC-4细胞系相关产品：RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞 
TCC-PAN2细胞系相关产品：Suzhou Human Glioma-44细胞、LMH细胞、IOSE-Van细胞 
NCI-H661细胞系相关产品：MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞 
TK-1细胞系相关产品：TM3细胞、PC-3M细胞、GLC-15细胞 
SW900细胞系相关产品：NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞 
HOP-62细胞系相关产品：LK2细胞、SK MEL 28细胞、WM-266-4细胞 
ONS-76细胞系相关产品：3D4/21细胞、LS1034细胞、SW48细胞 
Hs888T细胞系相关产品：C4 I细胞、SBC-5细胞、OCI-AML4细胞 
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