CL-11 人结肠癌细胞系

"CL-11 人结肠癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CL-11 人结肠癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
贴壁细胞传代实验准备事项：将15mL离心管、T25细胞培养瓶、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用。贴壁细胞传代实验步骤：将准备好的培养基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；从培养箱中取出待处理的细胞，在显微镜下观察细胞状态；用酒精消毒培养瓶，放入安全柜中；轻轻吸去细胞上清；加入2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，轻轻晃匀、覆盖所有细胞后，置于37℃培养箱静置消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；按比例将细胞悬液分装至培养瓶中；在显微镜下观察传代后的细胞密度及状态；将培养瓶放入培养箱中培养。注意事项：培养过程中需维持细胞处于对数生长期，80%左右即可传代，传代比例请参照说明书建议；消化时间不宜过长，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，难消化的细胞可分次消化，每次时间不超过5min；培养过程中需要定期换液，一般细胞建议2~3天换液一次。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
CL-11 人结肠癌细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CTSC-3细胞系相关产品：HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞 
Pa17C细胞系相关产品：H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞 
LMTK-细胞系相关产品：ECV细胞、MUM2B细胞、MOLM-13细胞 
ketr 3细胞系相关产品：HTSMC细胞、Granta-519细胞、OVCAR 4细胞 
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品：X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞 
SBC3细胞系相关产品：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞 
U2-OS细胞系相关产品：bEnd3细胞、SK-RC-52细胞、OAW-42细胞 
CMT-64细胞系相关产品：GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞 
BEL7405细胞系相关产品：GDM1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、CAL33细胞 
H-847细胞系相关产品：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞 
Pt-K1细胞系相关产品：HCC0070细胞、Kasumi-6细胞、NCI-H1373细胞 
Hs 888.Lu细胞系相关产品：HT细胞、PL12细胞、P3J细胞 
Pa017C细胞系相关产品：PLA802细胞、CWR22Rv1细胞、Li-7细胞 
CG4细胞系相关产品：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞 
SK.MEL.28细胞系相关产品：H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞 
HLEC-SRA 01/04细胞系相关产品：Hs675细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、Hs940.T细胞 
HLEC-SRA 01/04细胞系相关产品：Hs675细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、Hs940.T细胞 
NPA-87细胞系相关产品：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞 
NCI-H1792细胞系相关产品：MA 104细胞、COLO 678细胞、A-375SM细胞 
H-1092细胞系相关产品：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞 
CL-11 人结肠癌细胞系
Karpas 299细胞系相关产品：HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞 
HSC-I细胞系相关产品：NCI-H69细胞、Co 205细胞、HKC细胞 
DMS 53细胞系相关产品：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞 
SK-MEL-2细胞系相关产品：SNU638细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞、CCD 841 CoN细胞 
NCI-H716细胞系相关产品：GM 637细胞、NT2-D1细胞、PK13细胞 
HPAF-II细胞系相关产品：Reh细胞、DMS114细胞、A375-SM细胞 
SW 1990细胞系相关产品：MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞 
H-1770细胞系相关产品：RSC 96细胞、Fetal Human Lens-124细胞、PLC/PRF/5细胞 
NH6细胞系相关产品：MonoMac6细胞、WERI细胞、HDQ-P1细胞 
LM TK negative细胞系相关产品：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞 
Hmy.2 CIR细胞系相关产品：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞 
CAL78细胞系相关产品：MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞 
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品：COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞 
GC9811-P细胞系相关产品：Anip973细胞、HNE-3细胞、BE2_C细胞 
SK Mel 2细胞系相关产品：VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞 
SKML-28细胞系相关产品：CT26.CL25细胞、TE32细胞、PG13细胞 
Li-7细胞系相关产品：NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞 
293E细胞系相关产品：INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞 
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞系相关产品：RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞 
HC11细胞系相关产品：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞 
MLMA细胞系相关产品：NCI-H727细胞、COLO-16细胞、SW1417细胞 
MDCK细胞系相关产品：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞 
ETCC007细胞系相关产品：VP303细胞、Panc 08.13细胞、RCS细胞 
AD293细胞系相关产品：T-T细胞、MV4:11细胞、ID8/MOSEC细胞 
NCI-H358细胞系相关产品：OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞 
CTLA4 Ig-24细胞系相关产品：LC-1-sq细胞、LC-2/ad细胞、253JB-V细胞 
MB 157细胞系相关产品：UPCI:SCC090细胞、Z-138细胞、Hepatoma 22细胞 
SK-N-BE(2)-C细胞系相关产品：HOS (TE85)细胞、HCC 2185细胞、PL9细胞 
HIBEpiC细胞系相关产品：HEK 293A细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞、H2107细胞 
ssMCF-7细胞系相关产品：NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞 
IPAM-WT细胞系相关产品：Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞 
KTCTL-140细胞系相关产品：C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞 
WEHI164细胞系相关产品：RMS 13细胞、BL2141细胞、HCC0202细胞 
HuP-T3细胞系相关产品：SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞 
P-388细胞系相关产品：ACC-3细胞、SKNBE2细胞、HLF细胞 
Vx2细胞系相关产品：697细胞、NCIH2196细胞、Psi-2 DAP细胞 
OACP4C细胞系相关产品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、EOC 20细胞、NB-4细胞 
KYSE 510细胞系相关产品：NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞 
P3/ag细胞系相关产品：HECCL-1细胞、NCI-HUT-292细胞、B-cell with DC Morphology细胞 
HT 1197.T细胞系相关产品：RBSMC细胞、RMS 13细胞、KNS-42细胞 
HOC细胞系相关产品：H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞 
CL-11 人结肠癌细胞系
HTR8细胞系相关产品：JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞 
U138MG细胞系相关产品：HT3细胞、Y3.AG.1.2.3细胞、MSTO-211 H细胞 
MCF12F细胞系相关产品：hs 68细胞、MGc80-3细胞、TM4细胞 
TK-1细胞系相关产品：TM3细胞、PC-3M细胞、GLC-15细胞 
HCT8细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4细胞、G361mel细胞、MDA MB231细胞 
SMMC 7721细胞系相关产品：EBNA293细胞、NCIH1792细胞、H2347细胞 
L-M(TK-)细胞系相关产品：GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞 
AMO-1细胞系相关产品：Th17细胞、SSP-25细胞、VP303细胞 
CAL 27细胞系相关产品：NIH:OVCAR-4细胞、OCI Ly19细胞、H1373细胞 
BIC-1细胞系相关产品：BALB/c 3T3 clone A31细胞、NT2/D1细胞、HOS TE 85细胞 
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、NCIH1915细胞、SUDHL-2细胞 
LMTK-细胞系相关产品：ECV细胞、HuPT3细胞、SUP-B15细胞 
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