Vero C1008 非洲绿猴肾细胞系

"Vero C1008 非洲绿猴肾细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
Vero C1008 非洲绿猴肾细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
Vero C1008 非洲绿猴肾细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
NCI-H2330细胞系相关产品：SW 403细胞、NCI-H820细胞、MFC细胞 
TMK1细胞系相关产品：HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞 
NCI-H510细胞系相关产品：NCI-H1755细胞、BE(2)M17细胞、BI-Mel细胞 
HRA19细胞系相关产品：UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞 
LM2-4175细胞系相关产品：Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞 
Neukoplast细胞系相关产品：HKF细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、TOV21G细胞 
MCF7细胞系相关产品：CHG5细胞、GES-1细胞、L132细胞 
H4IIEC3细胞系相关产品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、MM1-S细胞、HCC2108细胞 
OC316细胞系相关产品：COLO320HSR细胞、WEHI-279细胞、Human Embryo Kidney-2细胞 
PL11细胞系相关产品：BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞 
C-28I2细胞系相关产品：RPPVEC细胞、H-1650细胞、NCI-H1993细胞 
Alpha Mouse Liver 12细胞系相关产品：KTC-1细胞、COV-362细胞、EAhy 926细胞 
MZ-CRC-1细胞系相关产品：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞 
F-81细胞系相关产品：BIC细胞、WM266细胞、X63细胞 
SN12C-PM6细胞系相关产品：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞 
8402细胞系相关产品：VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞 
U-87-MG细胞系相关产品：MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞 
NCI/ADR-RES细胞系相关产品：FM-88细胞、DC 2.4细胞、L-cell细胞 
SK-N-DZ细胞系相关产品：A-1847细胞、EC109细胞、BEL 7405细胞 
B16/F10细胞系相关产品：Panc_05_04细胞、CAL 39细胞、HCC366细胞 
Vero C1008 非洲绿猴肾细胞系
HCT 15细胞系相关产品：COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞 
Sp2/mIL-6细胞系相关产品：MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞 
P-815细胞系相关产品：P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞 
B16F10细胞系相关产品：CFPAC细胞、SupB15WT细胞、NB1RGB细胞 
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品：SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞 
Jurkat FHCRC细胞系相关产品：SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞 
Rat-2细胞系相关产品：KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞 
SUNE 1细胞系相关产品：Buffalo Rat Liver-3A细胞、SUDHL6细胞、GLAG-66细胞 
L-540细胞系相关产品：FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞 
HT-29/CX-1细胞系相关产品：231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞 
H-889细胞系相关产品：NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞 
GM00637细胞系相关产品：KYSE0410细胞、H847细胞、CTSC-3细胞 
SNT-8细胞系相关产品：Vero E-6细胞、HPAEC细胞、HET-1A细胞 
NK62a细胞系相关产品：OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞 
Homo sapiens No. 578, breast cells细胞系相关产品：TMK-1细胞、Ramos.2G6.4C10细胞、COLO 206F细胞 
NBL-1细胞系相关产品：LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞 
NCCIT细胞系相关产品：L-929细胞、Ca Ski细胞、NPC-TW01细胞 
H-740细胞系相关产品：UACC 812细胞、H-1436细胞、HNE-2细胞 
HuH28细胞系相关产品：IHH4细胞、LS 513细胞、PTK-2细胞 
H1155细胞系相关产品：HM细胞、C32 [Human melanoma]细胞、NCIH526细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞系相关产品：Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、Okayama University Medical School-23细胞、FHL124细胞 
OCLY8细胞系相关产品：PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞 
SW 1990细胞系相关产品：MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞 
Madin-Darby Canine Kidney细胞系相关产品：U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞 
KLN205细胞系相关产品：HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞 
293F细胞系相关产品：NCIH1876细胞、T_T_细胞、MV4;11细胞 
H-1836细胞系相关产品：Colo699细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、SK-N-AS细胞 
U373细胞系相关产品：ASPC1细胞、BIC1细胞、Y-79细胞 
MuM-2C细胞系相关产品：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞 
6-T CEM细胞系相关产品：1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞 
SW-48细胞系相关产品：COLO 16细胞、H-2030细胞、B16 F1细胞 
DLD 1细胞系相关产品：PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞 
Chang liver细胞系相关产品：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞 
NCI-N87细胞系相关产品：NRK细胞、NCI-H2196细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞 
H-1568细胞系相关产品：HKC细胞、Me Wo细胞、NP69SV40T细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞系相关产品：LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞 
NIT-1细胞系相关产品：NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞 
CA-46细胞系相关产品：B-95-8细胞、Daoy细胞、9L细胞 
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞 
HCC1833细胞系相关产品：HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞 
DMS 53细胞系相关产品：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞 
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MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞系相关产品：LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞 
RAW264.7细胞系相关产品：SK MEL 5细胞、U-266细胞、Panc02-H0细胞 
MRASMC细胞系相关产品：Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、EC9706细胞、CCD-18Co细胞 
MS1细胞系相关产品：H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞 
OP9细胞系相关产品：SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞 
C4-I细胞系相关产品：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞 
PG-4(S+L-)细胞系相关产品：F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞 
Jiyoye(P-2003)细胞系相关产品：Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞 
SMMC7721细胞系相关产品：CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞 
MGHU1细胞系相关产品：WM2664细胞、SK-N-BE2细胞、COLO 320 HSR细胞 
MPC-5细胞系相关产品：NCI-SNU-886细胞、OCI-Ly 1细胞、C166细胞 
NCI-H510细胞系相关产品：NCI-H1755细胞、FAO-1细胞、DH82细胞 
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