SK-RC-20 人肾癌细胞系

"SK-RC-20 人肾癌细胞系
细胞背景资料：肾癌 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
SK-RC-20 人肾癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
SK-RC-20 人肾癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
NCI-UMC-11细胞系相关产品：WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞 
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品：H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞 
BT-474细胞系相关产品：T-47-D细胞、Ly10细胞、BC-028细胞 
SUM 52细胞系相关产品：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞 
TOV-112细胞系相关产品：SW-626细胞、RWPE2细胞、RCSMC细胞 
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品：451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞 
MIHA细胞系相关产品：HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞 
LTPA细胞系相关产品：NCIH244细胞、HT-55细胞、NCIH1299细胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞系相关产品：H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞 
T8细胞系相关产品：Lu-65细胞、SK-SH-SY5Y细胞、RCC23细胞 
HEL细胞系相关产品：OSA细胞、MPP 89细胞、MDAMB175VII细胞 
578T细胞系相关产品：ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞 
HCC-2218细胞系相关产品：WRL 68细胞、SCC4细胞、RT-BM 1细胞 
HEK-A细胞系相关产品：LTPA细胞、VAESBJ细胞、NCIH747细胞 
PANC 327细胞系相关产品：HepG2/C3A细胞、PC-3M IE8细胞、2E8细胞 
COV 434细胞系相关产品：HEK/EBNA细胞、SKNBE2C细胞、HT1197细胞 
COV 434细胞系相关产品：HEK/EBNA细胞、SKNBE2C细胞、HT1197细胞 
Pa17C细胞系相关产品：H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞 
Daudi细胞系相关产品：SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞 
PaTu-8988s细胞系相关产品：8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞 
SK-RC-20 人肾癌细胞系
HCT GEO细胞系相关产品：ISHI细胞、Rainbow Trout Embryo细胞、T_T_细胞 
MAVER1细胞系相关产品：SNU-761细胞、HuNS1细胞、FF-WT-BJ细胞 
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品：MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞 
Panc-3_27细胞系相关产品：WiDr细胞、SUIT 2细胞、PC3M-2B4细胞 
LTEP-sm 1细胞系相关产品：Mono-Mac-6细胞、UPCI-SCC-090细胞、SNU-475细胞 
HCC1569细胞系相关产品：MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞 
ChaGo-K1细胞系相关产品：U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞 
NPA-87细胞系相关产品：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞 
HCC-1954BL细胞系相关产品：Walker256-TC细胞、WSUDLCL2细胞、MEF细胞 
H1373细胞系相关产品：Opossum Kidney细胞、SUP-T1细胞、JEKO细胞 
RTMC细胞系相关产品：PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞 
NCI522细胞系相关产品：MDA-kb2细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、OCI-LY-19细胞 
BIU-87细胞系相关产品：HUT 28细胞、COLO320DM细胞、MDA-MB-468-RED细胞 
Jiyoye(P-2003)细胞系相关产品：Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞 
OCIAML5细胞系相关产品：Leukemia 1210细胞、HS-294细胞、HEL-92-1-7细胞 
WEHI 164 TC细胞系相关产品：Hs683T细胞、OVCA 432细胞、MARC 145细胞 
UMC-11细胞系相关产品：Human Embryo Kidney-2细胞、TSCCa细胞、SNU-620细胞 
MES-SA-Dx5细胞系相关产品：CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞 
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞系相关产品：Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞 
B-95-8细胞系相关产品：L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞 
MFD-1细胞系相关产品：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞 
Hep 3B2细胞系相关产品：JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞 
DMS 53细胞系相关产品：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞 
HCC-1395细胞系相关产品：SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞 
Earle's L cells细胞系相关产品：MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞 
Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞系相关产品：GH3细胞、DrG细胞、Hs 819.T细胞 
NCIH1755细胞系相关产品：FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞 
T47D细胞系相关产品：AR-42J细胞、Hs895T细胞、Hs888T细胞 
Calu 6细胞系相关产品：LAN6细胞、H220细胞、K299细胞 
Kato-III细胞系相关产品：Ramos 1细胞、Mel-RM细胞、ME180细胞 
H-1651细胞系相关产品：A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞 
BNL-HCC细胞系相关产品：Walker 256细胞、Vero细胞、QGY细胞 
NS20Y细胞系相关产品：MA-782细胞、bEnd.3[BEND3]细胞、Mc Coy细胞 
MMQ细胞系相关产品：Potorous tridactylus Kidney 2细胞、PANC0504细胞、EBTr (NBL-4)细胞 
CCD-841CoTr细胞系相关产品：Fao细胞、NuTu 19细胞、UPCI-SCC-090细胞 
130T细胞系相关产品：L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞 
130T细胞系相关产品：L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞 
GM00346B细胞系相关产品：ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞 
MDA1386细胞系相关产品：BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞 
MDAMB134VI细胞系相关产品：R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞 
PA I细胞系相关产品：GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞 
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NCIH28细胞系相关产品：SJRH 30细胞、Tu 177细胞、3 LL细胞 
RPTEC TERT1细胞系相关产品：786O细胞、H2591细胞、CF PAC-1细胞 
GMK,BSC-1细胞系相关产品：TE 85 ClF-5细胞、HEK-AD293细胞、HARA-B细胞 
OVCAR 5细胞系相关产品：Nb-2细胞、MTC-TT细胞、SW527细胞 
MPC-5细胞系相关产品：NCI-SNU-886细胞、NCIH1703细胞、MOLM-14细胞 
As-PC1细胞系相关产品：MDA-MB-435-S细胞、U373细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞 
HCS2/8细胞系相关产品：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞 
RKO_AS45细胞系相关产品：NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞 
H-520细胞系相关产品：QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞 
SW-48细胞系相关产品：COLO 16细胞、PTK 2细胞、OVMANA细胞 
Kit225细胞系相关产品：SK-N-BE(2)-M17细胞、SKUT-1细胞、M2-10B4细胞 
BT-474细胞系相关产品：T-47-D细胞、MRAEC细胞、HCC38细胞 
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