"SK-RC-20:人肾癌传代细胞
细胞背景资料:肾癌
SBC-3细胞系相关产品:HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
H1435细胞系相关产品:Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SK-RC-20:人肾癌传代细胞
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
OC-316细胞系相关产品:ZR75_1细胞、HT-115细胞、alpha-TC1.6细胞
SY5Y细胞系相关产品:DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞
C3H/10T1/2 clone 8细胞系相关产品:TE 32细胞、PIG1细胞、RPMI-8402细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK-RC-20:人肾癌传代细胞
细胞生长特性:贴壁
PK136细胞系相关产品:NFS60细胞、Vero-76细胞、Institute for Medical Research-90细胞
HuCC-T1细胞系相关产品:HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞
MZCRC1细胞系相关产品:PNT-1A细胞、YD15细胞、HLF-a细胞
GM00637细胞系相关产品:KYSE0410细胞、H847细胞、CTSC-3细胞
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
GalK1细胞系相关产品:CaEs17细胞、T/G HA VSMC细胞、MB-49细胞
MDA453细胞系相关产品:EMT-6细胞、CEM clone 7细胞、P3/X63-Ag8细胞
DMS 273细胞系相关产品:AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞
CCD-19Lu细胞系相关产品:HTh74细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞、H358细胞
KHYG-1细胞系相关产品:Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
SW837细胞系相关产品:MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞
Hs839.T细胞系相关产品:SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞
EC9706细胞系相关产品:EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞
G401细胞系相关产品:PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞
CTSC-3细胞系相关产品:HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞
S91细胞系相关产品:EFM192细胞、Walker-256细胞、MDAMB134细胞
HCC0202细胞系相关产品:B-CPAP细胞、HT-29/CX-1细胞、OV-1063细胞
Panc 02细胞系相关产品:T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞
HBL1细胞系相关产品:U2-OS细胞、VSMC细胞、D324细胞
HRCEC细胞系相关产品:Calu3细胞、McArdle RH-7777细胞、OCI-Ly 10细胞
HRCEC细胞系相关产品:Calu3细胞、McArdle RH-7777细胞、OCI-Ly 10细胞
CII细胞系相关产品:MLFC细胞、bEnd3细胞、HEL92.1.7细胞
X63.Ag8.653细胞系相关产品:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
DMS53细胞系相关产品:Ca-Ski细胞、L428细胞、H1836细胞
NCI-H1105细胞系相关产品:NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
MDA-MB-157细胞系相关产品:A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞
SN12-PM6细胞系相关产品:Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞
UMUC3细胞系相关产品:JJN3细胞、hTERT-RPE1细胞、Rat Lung-65细胞
B-cell with DC Morphology细胞系相关产品:SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞
Fox/NY细胞系相关产品:ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞
SK-RC-20:人肾癌传代细胞
SUIT 2细胞系相关产品:K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞
PLB 985细胞系相关产品:SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞
RL952细胞系相关产品:MV-4:11细胞、IA-LM细胞、Sf-21细胞
HEC1A细胞系相关产品:NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
Large Cell Lung Cancer-103H细胞系相关产品:WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞
L细胞系相关产品:PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞
Immortalized Human Hepatocytes细胞系相关产品:H-7721细胞、H-774细胞、CaES-17细胞
CCD18Co细胞系相关产品:HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞
MLA-144细胞系相关产品:H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞
NCIH208细胞系相关产品:L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞
NE1-E6E7细胞系相关产品:SNU668细胞、H-1105细胞、MOLT 4细胞
CV 1细胞系相关产品:hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞
HeLa-S3细胞系相关产品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、P3-X63-Ag8细胞、SW 579细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品:MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
SNU-407细胞系相关产品:HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞
L5178Y TK+/-3.7.2c细胞系相关产品:293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞
Panc_08_13细胞系相关产品:CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞
NCI-H2195细胞系相关产品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞
Panc 4.03细胞系相关产品:WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞
PANC-04-03细胞系相关产品:MPC-83细胞、ADR-RES细胞、H-II-E-C3细胞
P3.times.63 Ag8.653细胞系相关产品:KYSE-520细胞、NCI.H460细胞、MM1-S细胞
MDA 231-LM2-4175细胞系相关产品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Ca761细胞、H719细胞
H7721细胞系相关产品:OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞
D341细胞系相关产品:hFOB1.19细胞、CAL-120细胞、KASUMI6细胞
MPC11细胞系相关产品:GalK 1细胞、H1238细胞、CF-PAC1细胞
NG108-15细胞系相关产品:MRAEC细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞、AA-Mel细胞
CCD33Co细胞系相关产品:T-47D细胞、U118-MG细胞、Leukemia L1210细胞
JVM3细胞系相关产品:NCI-SNU-761细胞、MDA-MB-231细胞、SH-SY5Y细胞
SN12-PM6细胞系相关产品:Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞
RPMI1788细胞系相关产品:NCI-H1436细胞、UM-UC14细胞、NCI-H1436细胞
U-87 MG细胞系相关产品:LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
SJ-RH30细胞系相关产品:SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞
WISH细胞系相关产品:OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞
NCI-H2172细胞系相关产品:Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞
SK-RC-20:人肾癌传代细胞
NE1细胞系相关产品:LS 180细胞、OV-2008细胞、MEC-1细胞
SK-RC 42细胞系相关产品:SW 13细胞、NK-92 MI细胞、H-841细胞
MUTZ-3细胞系相关产品:H1915细胞、EMT-6细胞、S37细胞
DMS 273细胞系相关产品:AN-3细胞、ACC-3细胞、766T细胞
HT-22细胞系相关产品:Hs-274-T细胞、COLO 320HSR细胞、CEM-T4细胞
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