MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞系

"MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞系
细胞背景资料：该细胞有多个亚克隆，可以作为体外研究成骨细胞分化的良好模型，尤其是ECM信号通路的作用。 
细胞形态：上皮细胞样 
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞系
有关实验室细胞培养基知识普及：经典的培养基有很多种，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是应用最广泛的培养基。其他如M１９９、IMDM、L１５培养基等也用于某些细胞的培养；MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度；BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的４倍，采用双倍的HCO３-和CO２浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为１０００mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为４５００mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞；Ham’s F１２是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F１２还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养；RPMI １６４０培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。 
细胞形态特性：成纤维细胞样 
JCA-1细胞系相关产品：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞 
MDCK.2细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-10A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、Hep G2-Luc细胞 
PL11细胞系相关产品：BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞 
WBF344细胞系相关产品：HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞 
AN3CA细胞系相关产品：MB 157细胞、C6661细胞、Rat podocyte细胞 
MRMT-1细胞系相关产品：HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞 
SW 1463细胞系相关产品：HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞 
H820细胞系相关产品：CHP-100细胞、PC 61细胞、IAR-20细胞 
TE-14细胞系相关产品：A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞 
QBI-293A细胞系相关产品：G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞 
Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞 
NOR-10细胞系相关产品：ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞 
3T3-Swiss albino细胞系相关产品：RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞 
BC-024细胞系相关产品：MGH-UI细胞、SUM 159细胞、MV-1-Lu细胞 
OVMANA细胞系相关产品：SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞 
J774 A.1细胞系相关产品：SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞 
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KYSE50细胞系相关产品：HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞 
NCI-157细胞系相关产品：KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞 
N-87细胞系相关产品：108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞 
MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞系
CCRF-SB细胞系相关产品：RT-BM 1细胞、NS1-1 Ag4.1细胞、C12细胞 
EB-1细胞系相关产品：SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞 
Adeno-293细胞系相关产品：VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞 
AU-565细胞系相关产品：LCLC-103H细胞、Clone 166细胞、Panc04.03细胞 
KP-2细胞系相关产品：NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞 
HS-294细胞系相关产品：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞 
A2008细胞系相关产品：OsACL细胞、AU-Mel细胞、H-35 Reuber细胞 
H7721细胞系相关产品：OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞 
NCI-H2110细胞系相关产品：E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞 
CCD-841-CoN细胞系相关产品：DOK细胞、SK MEL 28细胞、LK 2细胞 
HIT T-15细胞系相关产品：CORL23细胞、SGC 7901细胞、SK RC 20细胞 
Namalwa细胞系相关产品：A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞 
H-716细胞系相关产品：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞 
U-87细胞系相关产品：LLC-WRC 256细胞、TE-12细胞、McArdle RH-7777细胞 
Y 1细胞系相关产品：MESSA/Dx5细胞、U-251-MG细胞、P3J HR-1细胞 
TE-10细胞系相关产品：NGEC细胞、SK-N-BE(2)-C细胞、SUPB-15细胞 
343MG细胞系相关产品：Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞 
MKN-7细胞系相关产品：KM12 SM细胞、108CC15细胞、NR-8383细胞 
TM3细胞系相关产品：HRCEC细胞、NS653细胞、HSC-1细胞 
HCT/Taxo1细胞系相关产品：NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞 
MDAMB157细胞系相关产品：MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞 
BRL-3A细胞系相关产品：Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞 
TPC1细胞系相关产品：TE-4细胞、Mono Mac 1细胞、U-373MG细胞 
H1385细胞系相关产品：MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞 
MV3细胞系相关产品：TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞 
R2C细胞系相关产品：Y3-Ag1,2,3细胞、SW-620细胞、HOP-92细胞 
Hs-600-T细胞系相关产品：H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞 
H157细胞系相关产品：CCRF-CEM C1细胞、NCIH1048细胞、NCIH841细胞 
TR146细胞系相关产品：NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞 
IM95细胞系相关产品：CORL279细胞、Nakata-1细胞、Panc_04_03细胞 
KE-37细胞系相关产品：KE39细胞、6-T CEM细胞、HM1900细胞 
P30/Ohkubo细胞系相关产品：OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞 
H-1876细胞系相关产品：DHL-6细胞、SNU-182细胞、AML-193细胞 
ECV 304细胞系相关产品：SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞 
H-740细胞系相关产品：UACC 812细胞、H-1436细胞、HNE-2细胞 
HUSMC细胞系相关产品：H-847细胞、Hep G2细胞、COLO 320F细胞 
HIEC细胞系相关产品：Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞 
Duke University 4475细胞系相关产品：SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞 
WSU-DLCL(2)细胞系相关产品：MDCK细胞、V 79-4细胞、HCV 29细胞 
SK.MEL.2细胞系相关产品：Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞 
SUM102PT细胞系相关产品：H-920细胞、TE 354.T细胞、Chang liver细胞 
MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞系
H-2081细胞系相关产品：PK 15细胞、NuTu-19细胞、HCC-1569细胞 
HT144mel细胞系相关产品：MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞 
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞 
NCI-H508细胞系相关产品：293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞 
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞 
Y3M细胞系相关产品：HCCLM3细胞、DiFi细胞、DHL8细胞 
H22细胞系相关产品：KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞 
HCC-1569细胞系相关产品：WSUDLCL2细胞、AN3 CA细胞、Hs606T细胞 
BNL CL2细胞系相关产品：BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞 
SU-86-86细胞系相关产品：HCA 7细胞、HSAS1细胞、H-2452细胞 
CF PAC-1细胞系相关产品：WSU-DLCL(2)细胞、SK Hep1细胞、NCI-H295细胞 
PL11细胞系相关产品：BHK细胞、MDA-MB-175细胞、D341Med细胞 
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