B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞系

"B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞系
很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近３００种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题，并不是因为细胞消化最重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。 
细胞形态特性：上皮细胞样 
CoC1细胞系相关产品：D324细胞、L540细胞、74Int细胞 
WM-451Lu细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-1666细胞、LN-18细胞 
GM-215细胞系相关产品：H2286细胞、KP-N-YN细胞、MonoMac 6细胞 
YAC-1细胞系相关产品：THLE-3细胞、Hu-P-T3细胞、THP 1细胞 
TE7细胞系相关产品：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞 
SW982细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、HEI-193细胞、HS 1.Tes细胞 
Hs 636.T细胞系相关产品：EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞 
WM-239细胞系相关产品：C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞 
H146细胞系相关产品：NCTC 3960细胞、CWR22-Rv1细胞、HFLS-OA细胞 
H-1944细胞系相关产品：SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞 
bEnd.3[BEND3]细胞系相关产品：H1819细胞、FL83B细胞、BC3 H1细胞 
SCH细胞系相关产品：SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞 
Hep II细胞系相关产品：NCIH1581细胞、Anglne细胞、MHCCLM3细胞 
MDCK细胞系相关产品：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞 
KY-50细胞系相关产品：CL MC/9细胞、NCI-SNU-407细胞、Hs 606细胞 
U266S细胞系相关产品：MC3T3-E1细胞、NCI-H2198细胞、SNU-449细胞 
GM2131细胞系相关产品：RT-112细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、PIEC细胞 
IMR-32细胞系相关产品：BpRcl细胞、SKNF1细胞、Hs729T细胞 
LIPF155C细胞系相关产品：DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞 
Calu-6细胞系相关产品：GTL-16细胞、SW-13细胞、GM06141细胞 
B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞系
SCL I细胞系相关产品：UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞 
SUPB15细胞系相关产品：SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞 
NCI H716细胞系相关产品：OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞 
HT1197细胞系相关产品：190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞 
EL-4细胞系相关产品：NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞 
BC-023细胞系相关产品：PL5细胞、COLO320HSR细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞 
He-La细胞系相关产品：NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞 
HRA19细胞系相关产品：UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞 
RPMI7951细胞系相关产品：SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞 
SNU-668细胞系相关产品：Mac-1细胞、EU-4细胞、NCI-H660细胞 
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MFE-296细胞系相关产品：PIG1细胞、H-747细胞、A375mel细胞 
PLA801D细胞系相关产品：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞 
C4-2B细胞系相关产品：H-II-E-C3细胞、FRO81-2细胞、LCD细胞 
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Hs-578T细胞系相关产品：MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞 
PIG1细胞系相关产品：L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞 
Glioma-261细胞系相关产品：BHP 10-3细胞、H2141细胞、COLO 205细胞 
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CCRF/CEM-C7细胞系相关产品：SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞 
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞 
K1细胞系相关产品：McCoy B细胞、PLA-802细胞、PNEC30细胞 
TOV112细胞系相关产品：SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞 
Hs863T细胞系相关产品：NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞 
32D.3细胞系相关产品：TKB-1细胞、Hs 636.T细胞、Capan1细胞 
NCIH3255细胞系相关产品：EAhy 926细胞、A-375细胞、VK2 (E6/E7)细胞 
ETCC-007细胞系相关产品：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞 
Mel624细胞系相关产品：NCIH847细胞、CAL 148细胞、SK Mel 24细胞 
MV(4;11)细胞系相关产品：PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞 
H2126细胞系相关产品：AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞 
SJRH 30细胞系相关产品：NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞 
BJA-B1细胞系相关产品：Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞 
RPMI-8402细胞系相关产品：SuperTube细胞、ABE­8.1/2细胞、HDMEC细胞 
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C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品：MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞 
Neuro 2a细胞系相关产品：A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞 
801-D细胞系相关产品：IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞 
AML-2细胞系相关产品：OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞 
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞 
H1581细胞系相关产品：HSC-6细胞、L 132细胞、SPDC-CCL141细胞 
PC9细胞系相关产品：CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞 
Mel-RM细胞系相关产品：MDAMB436细胞、DR2R1610细胞、SCC 4细胞 
H889细胞系相关产品：MDAMB415细胞、MDA.MB.435细胞、Ramos 2G6 4C10细胞 
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品：MDA435细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、Mv1Lu细胞 
C38细胞系相关产品：SUDHL1细胞、H-II-E-C3细胞、MA 104细胞 
GM2132细胞系相关产品：CCD 841 CoTr细胞、Sf21细胞、NOZAWA细胞 
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