B16F1 小鼠黑色素瘤细胞

细胞属性：

 细胞特性：

种属来源:人

性别年龄:小鼠

组织来源:皮肤

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:DMEM+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞系背景

来源：B16 黑色素瘤细胞系最初由 C57BL/6 小鼠 皮肤黑色素瘤自发形成，后衍生出多个亚系（B16-F1、B16-F10）。

B16F1 特点：

低转移性（相比 B16-F10，肺转移能力较弱）。

高免疫原性（常用于肿瘤疫苗、免疫治疗研究）。

黑色素生成能力（可合成黑色素，用于色素代谢研究）。

2. 分子特征与关键标记

（1）基因与蛋白表达

MITF（小眼畸形转录因子）：调控黑色素合成。

Tyrosinase（酪氨酸酶）：黑色素生成关键酶。

CD44、CD133：部分研究认为与肿瘤干细胞特性相关。

PD-L1：可诱导表达，用于免疫逃逸研究。

（2）常见突变

BRAF 野生型（与人类黑色素瘤不同，B16 不依赖 BRAF V600E 突变）。

NRAS 突变（部分亚系可能携带，影响 MAPK 通路）。

PTEN 缺失/PI3K-AKT 激活（促进肿瘤生长）。

3. 培养条件与实验注意事项

（1）培养基与培养条件

基础培养基：DMEM（高糖） + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素。

生长特性：

贴壁生长，呈梭形或星形。

倍增时间：~18–24 小时。

黑色素沉积（高密度时可见深色颗粒）。

（2）关键实验操作

传代：0.25% 胰酶消化（避免过度消化）。

冻存：90% FBS + 10% DMSO，液氮长期保存。

黑色素检测：可通过 吸光度（OD405nm） 或 显微镜观察 评估。

4. 研究应用

（1）肿瘤免疫与免疫治疗

检查点抑制剂研究（抗 PD-1/PD-L1、CTLA-4 抗体）。

肿瘤疫苗开发（DC 细胞疫苗、mRNA 疫苗）。

CAR-T/NK 细胞治疗（靶向黑色素瘤抗原）。

（2）转移机制研究

肺转移模型（尾静脉注射，评估转移灶形成）。

侵袭实验（Transwell、3D 培养）。

（3）药物筛选

化疗药（达卡巴嗪、顺铂）敏感性测试。

靶向药（MEK 抑制剂、AKT 抑制剂）评估。

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