KYSE-450 人食管癌细胞系

"KYSE-450 人食管癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KYSE-450 人食管癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到最低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
KYSE-450 人食管癌细胞系
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞(绝大部分１min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-３细胞)，吹打不超过２０次后(一般１０次即可)，成小规模聚集(１０个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CHO-S细胞系相关产品：OPM-2细胞、NTera2 cl.D1细胞、KMB17细胞 
HCT FET细胞系相关产品：NBLAN5T细胞、MDCK supertube细胞、HO1-N-1细胞 
Michigan Cancer Foundation-10A细胞系相关产品：ST486细胞、VP303细胞、3T3-J2细胞 
SB细胞系相关产品：SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞 
L-5178-Y-R细胞系相关产品：WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞 
Hs 274细胞系相关产品：CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞 
MNNG/HOS细胞系相关产品：H2195细胞、Hs-852-T细胞、OCI-LY-3细胞 
BEAS2B细胞系相关产品：JOSK-M细胞、MCA 38细胞、WM-239-A细胞 
D562细胞系相关产品：MIA-PaCa-2细胞、HFT8810细胞、SHSY5Y细胞 
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞 
HEK-293FT细胞系相关产品：B16F10细胞、Jiyoye(P-2003)细胞、High 5细胞 
H-865细胞系相关产品：Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞 
MC3T3-E1 Subclone 4细胞系相关产品：RCF细胞、H184A1细胞、CAL 148细胞 
MEL细胞系相关产品：RS411细胞、QGP1细胞、TE 85 ClF-5细胞 
NCIH28细胞系相关产品：SJRH 30细胞、Tu 177细胞、3 LL细胞 
DHL4细胞系相关产品：IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞 
DHL4细胞系相关产品：IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞 
EPC细胞系相关产品：M059J细胞、SPCA1细胞、HCC1419细胞 
Jurkat clone A3细胞系相关产品：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞 
CCD 966SK细胞系相关产品：MS 751细胞、DHL8细胞、TGBC11TKB细胞 
KYSE-450 人食管癌细胞系
T 24细胞系相关产品：MDA-MB415细胞、ECC 10细胞、SUNE1细胞 
MBdSMC细胞系相关产品：NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞 
WBF344细胞系相关产品：HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞 
OVCAR5细胞系相关产品：SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞 
LAN5细胞系相关产品：SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞 
PK-15细胞系相关产品：PIGI细胞、SK Mel28细胞、GB1细胞 
HT-29/CX-1细胞系相关产品：231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞 
3T3NIH细胞系相关产品：LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞 
NCI747细胞系相关产品：N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞 
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞系相关产品：PG-4细胞、MESSA-DX5细胞、RCC4细胞 
OVCA-432细胞系相关产品：MRC-5细胞、NCI-H209细胞、SCC90细胞 
L2细胞系相关产品：D562细胞、TALL-104细胞、NPC-TW 039细胞 
3AA细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、LN299细胞、F9细胞 
NIH 3T6细胞系相关产品：CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞 
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FF-WT-BJ细胞系相关产品：hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞 
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SJ-RH30细胞系相关产品：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞 
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Panc5.04细胞系相关产品：Hs281T细胞、H2342细胞、TOV21细胞 
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HCC1438细胞系相关产品：SK-N-BE-2细胞、OVCA-433细胞、A-673细胞 
HepaRG细胞系相关产品：Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞 
D-341细胞系相关产品：NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞 
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品：bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞 
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MM96L细胞系相关产品：SF-767细胞、DoHH2细胞、IEC18细胞 
Ca-Ski细胞系相关产品：LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞 
SKMES1细胞系相关产品：MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞 
LIXC-002细胞系相关产品：B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞 
Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞系相关产品：HS852.T细胞、NCI-H146细胞、Giant Cell Tumor细胞 
ECC-10细胞系相关产品：LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞 
M3 Clone M-3细胞系相关产品：HMy2.CIR细胞、HN-6细胞、T/G HA-VSMC细胞 
NCl-H157细胞系相关产品：BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞 
HeLa S 3细胞系相关产品：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞 
SUM 159PT细胞系相关产品：GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞 
FBHE细胞系相关产品：NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞 
SK-MEL-3细胞系相关产品：HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞 
I90细胞系相关产品：MES 13细胞、SW1463细胞、INS-1细胞 
COLO 320DM细胞系相关产品：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞 
KYSE-450 人食管癌细胞系
U87细胞系相关产品：PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞 
LAN-1细胞系相关产品：NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞 
OCI/AML-5细胞系相关产品：EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞 
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞系相关产品：NCIH1838细胞、H157细胞、SK 1细胞 
SK 1细胞系相关产品：Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞 
AG06814-N细胞系相关产品：H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞 
M2-10B4细胞系相关产品：CMT 64细胞、IOSE-Van细胞、H522细胞 
184A1细胞系相关产品：Hep 3B2_1-7细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞、RK13细胞 
Hep G2-Luc细胞系相关产品：SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞 
NTC-200细胞系相关产品：Panc-05.04细胞、H-2052细胞、MDCK supertube细胞 
NCI-H358细胞系相关产品：OCI Ly3细胞、LIPF178C细胞、C918细胞 
Michigan Cancer Foundation-10A细胞系相关产品：ST486细胞、CL1-5细胞、HSC4细胞 
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