HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞系

"HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞系
细胞背景资料：该细胞由E.V.Gaffney及其同事从一位没有乳癌家族史的供者乳汁中建立，培养出来的细胞染色体组型在第７代时就不正常；电镜照片显示有微丝、张力原纤维和桥粒；Southern转移表明有整合型SV４０病毒基因，当作正常细胞。 
细胞形态：上皮细胞样 
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到最低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞系
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。 
细胞形态特性：上皮样 
OCI-Ly3细胞系相关产品：C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞 
Hs294细胞系相关产品：HIT细胞、COLO 201细胞、MDA-MB435细胞 
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞 
HEK293EBNA细胞系相关产品：OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞 
Hep-G2/C3A细胞系相关产品：alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞 
Rabbit Kidney 13细胞系相关产品：NCIH1650细胞、A2780CP70细胞、SK-N-BE2C细胞 
HCC366细胞系相关产品：L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞 
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TOV21G细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞 
LIM 1215细胞系相关产品：U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞 
NCIH460细胞系相关产品：Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞 
BNL-CL.2细胞系相关产品：NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞 
NS1细胞系相关产品：H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞 
Y1细胞系相关产品：CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞 
V79-1细胞系相关产品：MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞 
V79-1细胞系相关产品：MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞 
OUMS23细胞系相关产品：LA795细胞、WEHI-164细胞、Panc 03.27细胞 
MC3T3-E1 Subclone 4细胞系相关产品：RCF细胞、H184A1细胞、CAL 148细胞 
NCI-H838细胞系相关产品：hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞 
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞系
G361mel细胞系相关产品：VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞 
RWPE-1细胞系相关产品：NCI-H2073细胞、EFM192A细胞、TE3细胞 
HMC3细胞系相关产品：LC-1Sq细胞、CG-4细胞、HConEpic细胞 
Panc-08.13细胞系相关产品：C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞 
MONO-MAC 6细胞系相关产品：H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞 
H9c2(2-1)细胞系相关产品：MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞 
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Wien-133细胞系相关产品：NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞 
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Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品：NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞 
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D283-MED细胞系相关产品：MBVP细胞、CAL 78细胞、WM115-mel细胞 
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KMB 17细胞系相关产品：MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞 
PT-67细胞系相关产品：Sp 2/0-Ag 14细胞、C666-1细胞、NCI-SNU-620细胞 
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SNK6细胞系相关产品：BJA-B1细胞、H69C细胞、CCC-HPF-1细胞 
NCIH2029细胞系相关产品：16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞 
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RN-c细胞系相关产品：BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞 
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞系
3T6细胞系相关产品：L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞 
CESS细胞系相关产品：EFM-19细胞、B16 melanoma细胞、CaSki细胞 
Human Kidney-2细胞系相关产品：NCI-H1975细胞、B16-F10细胞、H-1876细胞 
IHH4细胞系相关产品：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞 
LS-174细胞系相关产品：OLN-93细胞、NCI-H1703细胞、HCC-2279细胞 
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Kasumi-1细胞系相关产品：NCIH1623细胞、HL-60 Clone 15细胞、NCI-H1155细胞 
LC-1-sq细胞系相关产品：RH35细胞、P30OHK细胞、Panc_03_27细胞 
PL11细胞系相关产品：BHK细胞、MDA-MB-175细胞、D341Med细胞 
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品：MDA157细胞、A431/P细胞、MCF-7B细胞 
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