"NCI-H441 cell line人肺腺癌细胞系
细胞背景资料:NCI-H441建系于1982年(A.F.Gazdar,etal.)。该细胞分离自一名肺腺癌患者的心包液。该细胞能在半固体琼脂糖中形成克隆,并能表达肺泡表面活性蛋白A。该细胞在有血清培养基中倍增时间为58小时,在无血清培养基中倍增时间为99-138小时。
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H441 cell line人肺腺癌细胞系
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:贴壁生长
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
NCI-H441 cell line人肺腺癌细胞系
细胞形态特性:上皮细胞样
PC-3M 2B4细胞系相关产品:KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞
CMT-93细胞系相关产品:Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
RMa-bm细胞系相关产品:CT26WT细胞、HEL-92.1.7细胞、HCC2218细胞
KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
TOV-112D细胞系相关产品:ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞
KPL-4细胞系相关产品:NCIH1417细胞、SW626细胞、BMDC细胞
NCIH1770细胞系相关产品:J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品:HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞
Huh-7细胞系相关产品:MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
HEP3B2细胞系相关产品:Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞
Microbiological Associates-104细胞系相关产品:HR1K细胞、KG-1a细胞、LN 382细胞
4T1细胞系相关产品:BSC40细胞、T173细胞、SK_HEP1细胞
HIC细胞系相关产品:hA549细胞、GP2d细胞、SF 763细胞
NCI-H441 cell line人肺腺癌细胞系
NCI-H1672细胞系相关产品:BL2141细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞、OVCA432_Bast细胞
H2009细胞系相关产品:MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞
GEO细胞系相关产品:NCI-H1373细胞、BSC-40细胞、OCI-LY-7细胞
GEO细胞系相关产品:NCI-H1373细胞、BSC-40细胞、OCI-LY-7细胞
D283 Med细胞系相关产品:253JB-V细胞、L 428细胞、BC3H1细胞
NCI-H2170细胞系相关产品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、BHT101细胞、COLO-824细胞
LC-2-Ad细胞系相关产品:SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞
Sp 2817细胞系相关产品:RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞
RCSMC细胞系相关产品:OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞
H-865细胞系相关产品:Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞
ATN1细胞系相关产品:NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
BIC细胞系相关产品:NCI-H1563细胞、Adeno 293细胞、Panc-3_27细胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞系相关产品:NCI-H-69细胞、WI38细胞、H-292细胞
NUGC3细胞系相关产品:VMRC-RCZ细胞、SU-DHL6细胞、16-HBEo细胞
Anip973细胞系相关产品:WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞
SKNBE2C细胞系相关产品:C17细胞、ECV细胞、JiyoyeP-2003细胞
KYSE 30细胞系相关产品:P3HR1细胞、EA.Hy926细胞、PCI-04B细胞
CAMA-1细胞系相关产品:Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞
HL-7702细胞系相关产品:Ly3细胞、H508细胞、BPH1细胞
CoCL2细胞系相关产品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞
SUM149细胞系相关产品:KBM7细胞、PA317细胞、SP-2/0-AG14细胞
Hs888 Lu细胞系相关产品:NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞
SK ES 01细胞系相关产品:MKN45细胞、PSN-1细胞、NCI-H1385细胞
Hs 839.T细胞系相关产品:NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞
CAL-62细胞系相关产品:mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞
NB9细胞系相关产品:WM451细胞、A-9细胞、MPC11细胞
HSC-2细胞系相关产品:Hs-578-T细胞、EPC细胞、MPC-11细胞
Madin Darby Canine Kidney细胞系相关产品:M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
RTE细胞系相关产品:ECC-1细胞、UACC 893细胞、H-250细胞
H2591细胞系相关产品:Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
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NBL-S细胞系相关产品:CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
U14细胞系相关产品:IFRS1细胞、DR2R 1610细胞、H-1838细胞
KASUMI1细胞系相关产品:9L细胞、Tca-8113细胞、NCI-H295R细胞
HC11细胞系相关产品:MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
HCC1569细胞系相关产品:MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞
MDAMB175细胞系相关产品:FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞
JiyoyeP-2003细胞系相关产品:UCLA SO M14细胞、B5537SKIN细胞、Panc813细胞
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BNL CL2细胞系相关产品:BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
H-2122细胞系相关产品:SF126细胞、MDA231-LM2-4175细胞、TF1细胞
H4-IIE-C3细胞系相关产品:CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞
NCI-H441 cell line人肺腺癌细胞系
CEMx721.174.T2细胞系相关产品:Tn5B1-4细胞、TE-13细胞、2BS细胞
32D.3细胞系相关产品:TKB-1细胞、Hs 636.T细胞、Capan1细胞
C4-2B细胞系相关产品:H-II-E-C3细胞、FRO81-2细胞、LCD细胞
MS-751细胞系相关产品:H-1184细胞、COLO.205细胞、H847细胞
C33细胞系相关产品:2B4细胞、BCaP 37细胞、OVCAR-10细胞
JTC-28细胞系相关产品:G 292 Clone A 141B1细胞、Human Embryonic Skin细胞、NB9细胞
RMa-bm细胞系相关产品:CT26WT细胞、Rin-M-5F细胞、FO [Mouse myeloma]细胞
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