"ES-2 Thawing人卵巢癌细胞系
细胞背景资料:ES-2细胞系源于一位47岁黑人女性的临床卵巢透明细胞癌手术标本。该细胞对中低剂量的阿霉素,顺铂,双乙基亚硝脲,表鬼臼毒素吡喃葡糖苷等化疗药物有一定耐药性。该细胞少量表达糖蛋白P。
细胞形态:上皮细胞样
ES-2 Thawing人卵巢癌细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一次
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ES-2 Thawing人卵巢癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,消化温度是37℃;2)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度;(3)吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液;2)吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中;3)平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟;4)弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记;2)分装:将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖;3)继续培养:用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
细胞形态特性:上皮样
SNU354细胞系相关产品:NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞
U-118 MG细胞系相关产品:DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞
HEK 293 EBNA细胞系相关产品:Rca-B细胞、Hs 683.T细胞、CHL-CL-11细胞
LS-1034细胞系相关产品:NCI-H2107细胞、OsACL细胞、A 549细胞
HNE-2细胞系相关产品:KOPN-8细胞、CL1.0细胞、Hepa 1-6细胞
Hs839T细胞系相关产品:U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
Hs 695T细胞系相关产品:P3/NS1/1-Ag4-1细胞、L-6细胞、Hos TE-85细胞
EBNA-293细胞系相关产品:SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞
SCC25细胞系相关产品:Hs-940细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、P3-Jiyoye细胞
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Fetal Bovine Heart Endothelial细胞系相关产品:HT22细胞、U 266细胞、PLCPRF5细胞
HSC-4细胞系相关产品:RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞
95D细胞系相关产品:OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞
RPMI 1846细胞系相关产品:AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞
H647ell细胞系相关产品:SMMC-7721细胞、L6细胞、HEK-293细胞
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PaTu 8988 S细胞系相关产品:Panc 02细胞、PLC细胞、NCTC clone 929细胞
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JM细胞系相关产品:NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞
Reuber H-35细胞系相关产品:STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞
ES-2 Thawing人卵巢癌细胞系
IPI-2I细胞系相关产品:KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞
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Pfeiffer细胞系相关产品:L-Wnt-3A细胞、OCILY7细胞、MFHL-2细胞
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ES-2 Thawing人卵巢癌细胞系
HET-1A细胞系相关产品:GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
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