"CCD-966SK Adherent人皮肤纤维母细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较高,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CCD-966SK Adherent人皮肤纤维母细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
PT-K75细胞系相关产品:KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
UPCI-SCC-154细胞系相关产品:C-28/I2细胞、NCIH209细胞、WM-115细胞
H1522细胞系相关产品:Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
A1847细胞系相关产品:NCI-H345细胞、NCI-H647细胞、P-2003细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
Pt-K1细胞系相关产品:HCC0070细胞、Kasumi-6细胞、NCI-H1373细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
CCD-966SK Adherent人皮肤纤维母细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
NCI-H23细胞系相关产品:HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
Leghorn Male Hepatoma cell line细胞系相关产品:2V6.11细胞、P-19细胞、COR-L 105细胞
GB-1细胞系相关产品:DLD-1细胞、RPVSMC细胞、MOLT3细胞
SW 403细胞系相关产品:NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
SN12C细胞系相关产品:H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
P31/Fujioka细胞系相关产品:B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
D341MD细胞系相关产品:SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
MLMA细胞系相关产品:NCI-H727细胞、COLO-16细胞、SW1417细胞
Panc2.03细胞系相关产品:AMJ2-C8细胞、U266BL细胞、C 6细胞
UCLA RO-81-A-1细胞系相关产品:293 EBNA细胞、Molm 13细胞、SUDHL8细胞
Pt K2 (NBL-5)细胞系相关产品:NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞
BaF3细胞系相关产品:ECV304细胞、NCIH526细胞、H-1437细胞
COLO 738细胞系相关产品:T 98 G细胞、Hs 688(A).T细胞、P560细胞
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RPMI-7951细胞系相关产品:HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞
SW-837细胞系相关产品:P3HR-1细胞、WM451Lu细胞、TCam-2细胞
OS-RC-2细胞系相关产品:NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞
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H2286细胞系相关产品:KU-812F细胞、MUVEC细胞、SuDHL 8细胞
A-875细胞系相关产品:OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞
KM932细胞系相关产品:T-24细胞、Caco-2细胞、HRC-99细胞
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GM16136细胞系相关产品:RGM1细胞、MUS-M1细胞、C3H10T1-2细胞
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HD11细胞系相关产品:GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞
OsA-CL细胞系相关产品:TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
NCI-SNU-1040细胞系相关产品:DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
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P3/NS-1细胞系相关产品:3LL细胞、SUM-102PT细胞、IPLB-Sf21细胞
HEC1-B细胞系相关产品:HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞
HPAF II细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
SUM-159PT细胞系相关产品:Hs683细胞、OCI-LY-3细胞、LC2/Ad细胞
NCIH1581细胞系相关产品:H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞
A-375SM细胞系相关产品:HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞
MHCC 97细胞系相关产品:LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞
HT144mel细胞系相关产品:MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞
Vero-76细胞系相关产品:Jurkat Clone E6-1细胞、KMS26细胞、NCIH1694细胞
SCL II细胞系相关产品:IBRS-2细胞、HO-8910细胞、J774.A1细胞
TN5B14细胞系相关产品:MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞
MC-CAR细胞系相关产品:NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞
IPECJ2细胞系相关产品:EOC-20细胞、CAL-12T细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞
HPAF II细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
NCI-H661细胞系相关产品:MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
TE671/RD细胞系相关产品:WB-F344细胞、NCIH345细胞、SNU739细胞
UMNSAH-DF1细胞系相关产品:PC10细胞、BE(2)-M17细胞、CAL-12T细胞
SNU449细胞系相关产品:BNL 1MEA.7R.1细胞、NCI-H1975细胞、HUC-1细胞
LNCaP clone FGC细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞
C8-D1A细胞系相关产品:MN9D细胞、CCRF CEM细胞、CSQT-2细胞
hRPTC细胞系相关产品:PANC0504细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞、KCL-22细胞
OCI-Ly 18细胞系相关产品:8305C细胞、F81细胞、P-3J细胞
H1836细胞系相关产品:H-1581细胞、MUGCHOR1细胞、GM00215A细胞
MDCK II细胞系相关产品:SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞
CT26.CL25细胞系相关产品:MDA-435细胞、H-64细胞、H2122细胞
CCD-966SK Adherent人皮肤纤维母细胞系
CTLL-2细胞系相关产品:M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
OVCAR433细胞系相关产品:BEL/FU细胞、HBZY-1细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞系相关产品:EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞
SK Col 1细胞系相关产品:KOSC-2细胞、NCIH2228细胞、NCI H929细胞
D407 RPE细胞系相关产品:NCI H508细胞、SuDHL 10细胞、GM05384细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品:HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
KBM5细胞系相关产品:KMM-1细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、NW38细胞
KYSE-520细胞系相关产品:Bx-PC3细胞、S180细胞、H35细胞
HeLa-S3细胞系相关产品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、P3-X63-Ag8细胞、SW 579细胞
OVISE细胞系相关产品:HCC1954BL细胞、UO.31细胞、EOMA细胞
MCF10-A细胞系相关产品:ME-1 [Human leukemia]细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、118 MG细胞
GB-1细胞系相关产品:DLD-1细胞、HCC1143细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞
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