产品名称：人皮肤成纤维细胞（有限细胞系）Hs865.Sk
更多细胞及培养信息可参考我司官网：www.yajimall.com
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液（货号：C7001） |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 |
人皮肤成纤维细胞（有限细胞系）Hs865.Sk收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
人皮肤成纤维细胞（有限细胞系）Hs865.Sk培养步骤
一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃
人皮肤成纤维细胞（有限细胞系）Hs865.Sk部分相关细胞如下：
YS1350 TJ905 人胶质瘤细胞TJ905
YS1351 TPC1 人甲状腺乳头状癌细胞TPC1
YS1352 TT 人甲状腺癌细胞TT
YS1353 TU138 人喉癌细胞TU138
YS1354 TU212 人喉癌细胞TU212
YS1355 U118MG 人脑星形胶质母细胞瘤U118MG
YS1356 U20SU2OS 人成骨肉瘤细胞U20SU2OS
YS1357 U251MGTMZ 人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞U251MGTMZ
YS1358 U251MGTMZ/LUC 人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞+LUCU251MGTMZ/LUC
YS1359 U251MG 人类星形胶质细胞瘤细胞U251MG
YS1360 U266B1 人骨髓瘤细胞U266B1
YS1361 U87MG 人脑星形胶质母细胞瘤U87MG
YS1362 U87MG/RFP 人脑星形胶质母细胞瘤U87MG/RFP
YS1363 U937 人淋巴瘤细胞U937
YS1364 UMUC3 人膀胱移行细胞癌UMUC3
YS1365 VCAP 人前列腺癌细胞VCAP
YS1366 WERIRB1 人视网膜神经胶质瘤细胞WERIRB1
YS1367 WM115 人恶性黑色素瘤细胞WM115
YS1368 WPMY1 人正常前列腺基质细胞WPMY1
YS1369 WRL68 人正常肝细胞WRL68
YS1370 XWLC05 人肺腺癌细胞系云南宣威XWLC05
YS1371 XWLC05/GFP 人肺腺癌细胞系+GFP云南宣威XWLC05/GFP
YS1372 Y79 人视网膜母细胞瘤细胞Y79
YS1373 ZJU0430 人胆囊癌细胞系ZJU0430
YS1374 ZJU0430/LUC 人胆囊癌细胞系ZJU0430/LUC
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