人真皮成纤维细胞

人真皮成纤维细胞

从健康供体真皮成纤维细胞组织标本经机械分离与胶原酶 II 联合消化获取成纤维细胞，经差速贴壁法纯化后接种于纤维连接蛋白包被培养皿中，采用 DMEM/F12 完全培养基（含 10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺及 1% 非必需氨基酸）维持培养；通过免疫荧光检测 FSP-1/S100A4、α-SMA（活化型）及 PDGFR-β 表达，Western blot 分析细胞外基质蛋白（胶原 I、纤连蛋白）分泌水平，确认成纤维细胞功能表型。

产品名称：人真皮成纤维细胞

英文名称： Human Dermal Fibroblasts

组织来源： 皮肤组织

默认种属 ：人

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的人真皮成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来。

质量检测  实验室分离的人真皮成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 人真皮成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

人真皮成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来
冻存管 37℃水浴快速融解，仅剩微量冰晶取出。

酒精消毒管壁，超净台转移细胞悬液至离心管。

1000rpm 离心 5min，弃上清废液。

真皮成纤维细胞完全培养基吹打重悬细胞沉淀。

计数，标准密度接种培养瓶，十字晃动混匀。

37℃、5% CO₂培养箱静置，24h 观察贴壁。

细胞汇合 80%，去除旧培养基，更换新鲜培养基，准备传代。

1.取材过程需严格无菌操作，组织块用PBS冲洗3次以上以去除血液残留，减少培养污染风险。

2.培养器皿需用0.1%明胶溶液包被30分钟以上，去除未结合明胶后使用。

3.该细胞对培养条件较为敏感，建议初次培养时设置多个平行实验以提高成功率。

4.培养基中添加10-15%胎牛血清即可满足成纤维细胞生长需求，高血清浓度可加速细胞增殖。

5.建议传代比例为1:2，每2-3天更换新鲜培养基，维持细胞最佳生长状态。