"KYSE-50 Adherent低分化人食管鳞癌细胞系
细胞背景资料：食管鳞癌；男性
细胞形态：上皮细胞样
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在-20°C，解冻在4°C进行，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于-20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度细胞碎片增多，黑渣子增多，细胞会成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KYSE-50 Adherent低分化人食管鳞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
AHH1细胞系相关产品：GOTO细胞、DKMG细胞、NCI-HUT-596细胞
AE 1201细胞系相关产品：Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞
HT-1197细胞系相关产品：766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
L615细胞系相关产品：GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
DMS273细胞系相关产品：CF PAC-1细胞、CC-LP-I细胞、P-815细胞
KFB细胞系相关产品：YAC-1细胞、KYSE0030细胞、TK-10细胞
细胞生长特性：贴壁
KYSE-50 Adherent低分化人食管鳞癌细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍：１)CO２培养箱：CO２培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O２浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO２培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要；２)烘箱(干燥箱)：用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，烘箱内温度一般要达到１６０℃以上，通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至１００℃时，停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门，以免骤冷导致玻璃器皿破裂，应等温度自然下降至１００℃以下后可开门。３)超净工作台/生物安全柜：细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在１００级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。４)液氮罐：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。５)超低温冰箱：细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般４℃下存放３０min，转放-２０℃ １ hour，再转入-７０至-８０℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-１９６℃)，这时就必须配备一台-８６℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。６)恒温水浴：从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于３７℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。７离心机：细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外，移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器，发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
CMEC/D3细胞系相关产品：DB细胞、GM00215A细胞、FBHE细胞
MIA PaCa-2细胞系相关产品：NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞
293 c18细胞系相关产品：NCI-SNU-668细胞、HPAF-I细胞、A431/P细胞
SGC7901细胞系相关产品：Daoy细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDA-415细胞
Vero 76 clone E6细胞系相关产品：EFO 27细胞、HMCB细胞、PaTu-8988s细胞
SF-295细胞系相关产品：HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞
MCF7-CTRL细胞系相关产品：SK HEP-1细胞、RS411细胞、Caco-2细胞
Neuro 2a细胞系相关产品：A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞
PC9细胞系相关产品：CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞
Y1细胞系相关产品：CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
SK_N_BE2C细胞系相关产品：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞
WERI-Rb 1细胞系相关产品：C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
bEnd.3[BEND3]细胞系相关产品：H1819细胞、FL83B细胞、BC3 H1细胞
KYSE-50 Adherent低分化人食管鳞癌细胞系
QBC-939细胞系相关产品：RC13细胞、TSUpr1细胞、P31/Fujioka细胞
NCI-H146细胞系相关产品：B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞
RCCJF细胞系相关产品：HSC-1细胞、UMUC1细胞、CLONE M3细胞
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Leukemia L1210细胞系相关产品：Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞
HCC1171细胞系相关产品：Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞
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VeroC1008细胞系相关产品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
MDAMB231细胞系相关产品：MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞
mRTEC细胞系相关产品：MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞
PA-TU S细胞系相关产品：NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞
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3396细胞系相关产品：MDA MB 361细胞、Panc 05.04细胞、PC-3M-2B4细胞
AtT 20细胞系相关产品：HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
NCI H548细胞系相关产品：HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞
NCI-H1648细胞系相关产品：CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞
HEM-L细胞系相关产品：Z310细胞、SU.86.86细胞、ECC-12细胞
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MAVER细胞系相关产品：HuH 6细胞、FL-83B细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞
HOP-92细胞系相关产品：L-WRN细胞、SCC25细胞、LA-N-6细胞
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JB 6细胞系相关产品：H1417细胞、16-HBE细胞、FC33细胞
OC-316细胞系相关产品：ZR75_1细胞、HT-115细胞、alpha-TC1.6细胞
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U373MG细胞系相关产品：TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
COV504细胞系相关产品：H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞
NCI-H2196细胞系相关产品：MA-104细胞、6-10B细胞、H-1915细胞
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
H-2170细胞系相关产品：WILL-2细胞、Y-79细胞、RN-c细胞
VMM5A细胞系相关产品：CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
CAL 78细胞系相关产品：SNU-387细胞、U138-MG细胞、MB49细胞
OAW-42细胞系相关产品：SKNDZ细胞、Granta519细胞、NCIH2085细胞
HEP-3B2细胞系相关产品：CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
OCILY3细胞系相关产品：Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
KYSE-50 Adherent低分化人食管鳞癌细胞系
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
T-HSC细胞系相关产品：SNU-119细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、ROS17/2.8细胞
R D细胞系相关产品：CAL 120细胞、MDA-MB-175VII细胞、SUM 149细胞
Tj-905细胞系相关产品：GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞
BT 20细胞系相关产品：NCI-HUT-460细胞、NE-4C细胞、NCI-H2122细胞
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品：COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞
HC-11细胞系相关产品：Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞
IBRS-2细胞系相关产品：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
HepG2-luc细胞系相关产品：SKNO1细胞、TE 671细胞、NRK clone 49F细胞
ZR-75-30细胞系相关产品：EBC-1/original细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、L-5178-Y-R细胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞系相关产品：OVCAR-5细胞、NSC-34细胞、BE(2)-M17细胞
293 c18细胞系相关产品：NCI-SNU-668细胞、C666-1细胞、NCI H226细胞
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