KYSE-50 Cell|低分化人食管鳞癌细胞

"KYSE-50 Cell|低分化人食管鳞癌细胞

细胞背景资料：食管鳞癌；男性

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

NR8383.1细胞类似产品：：NCIH520细胞、COC1/CDDP细胞、A2058细胞

Panc 02细胞类似产品：：T47-D细胞、A-375.S2细胞、P3X63NS1细胞

PIEC细胞类似产品：：SK-SH-SY5Y细胞、EFM-192B细胞、NCI-H2108细胞

U-hth74细胞类似产品：：MEL-526细胞、hFOB细胞、HEL-1细胞

H1650细胞类似产品：：Jurkat E6.1细胞、NCI522细胞、HEB细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

KYSE-50 Cell|低分化人食管鳞癌细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

Pro-5WgaRI3C细胞类似产品：：NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞

KYSE 70细胞类似产品：：REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞

CHO-Lec1细胞类似产品：：H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞

A2780/CP细胞类似产品：：HGC-27细胞、Hs-746T细胞、SNU-601细胞

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

细胞传代比例：对于有限细胞系，传代时以二、四、八或十六倍(传代比率分别是2、4、8和16)降低细胞密度，计算群体倍增数更容易(即分别是传代比率2对应1次倍增，4对应2次倍增，8对应3次倍增，16对应4次倍增)；例如，一传八的培养物需要3次倍增才能达到原来相同的细胞密度。脆弱的或生长缓慢的细胞系通常一传二，而有活力的，生长快速的细胞系可以一传八，甚至一传十六。有些连续细胞系可一传五十或一传100。一旦细胞系变为连续细胞系(通常经过150次或200次倍增以上)，细胞浓度是主要参数，培养浓度应降至10(4)/ml--10(5)/ml之间。可选择传代间隔合适的传代比率或稀释度，或许为1周或2周，同时要保证：细胞密度不可稀释过低，使其延迟期合理(在24小时以内)，可重新进入生长周期；而且在下次传代前不进人平台期。

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MMAc.SF细胞类似产品：：PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞

Spodoptera frugiperda clone 9细胞类似产品：：IPLB-Sf21细胞、VP 267细胞、KBM5细胞

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