"CNE-2 Adherent人鼻咽癌细胞系
细胞背景资料：１９８３年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鳞癌组织；原代细胞胰蛋白酶消化，４８小时开始生长，首次传代２０天。裸鼠体内移植１００%成瘤。
细胞形态：上皮细胞样
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
CNE-2 Adherent人鼻咽癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
有关实验室细胞培养基知识普及：经典的培养基有很多种，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是应用最广泛的培养基。其他如M１９９、IMDM、L１５培养基等也用于某些细胞的培养；MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度；BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的４倍，采用双倍的HCO３-和CO２浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为１０００mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为４５００mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞；Ham’s F１２是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F１２还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养；RPMI １６４０培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
HTR-8/SV-neo细胞系相关产品：T24细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H1666_DA细胞
BHT-101细胞系相关产品：MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
C-6细胞系相关产品：MRC9细胞、JIMT细胞、GM-637细胞
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Karpas 299细胞系相关产品：HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞
SK-N-BE2C细胞系相关产品：MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞
ACHN细胞系相关产品：HCV 29细胞、BrCL18细胞、MDA-MB-468细胞
细胞生长特性：贴壁生长
CNE-2 Adherent人鼻咽癌细胞系
细胞形态特性：上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够高，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻最近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
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