"CNE-2 Cell|人鼻咽癌细胞
细胞背景资料:1983年由谷淑燕、孔繁裔等建系;源自人鼻咽低分化鳞癌组织;原代细胞胰蛋白酶消化,48小时开始生长,首次传代20天。裸鼠体内移植100%成瘤。
细胞形态:上皮细胞样
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握HAO细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握HAO消化浓度,当消化液浓度过GAO时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长:贴壁
HEK/EBNA细胞类似产品::K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞
HCC-1171细胞类似产品::MCF-10A细胞、MDCK细胞、7860细胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞类似产品::H9c2 (2-1)细胞、ES-2细胞、KYSE520细胞
FHCRC subclone 11细胞类似产品::3T3细胞、Hs606T细胞、QGY 7701细胞
SK UT 1细胞类似产品::SaOS-2细胞、X63-Ag8.653细胞、U266 Bl细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CNE-2 Cell|人鼻咽癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
预防细胞污染的注意事项:实验进行前,超净台用紫外灯照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品,避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;不要在打开的容器瓶口正上方操作,容器打开后,倾斜45°操作,操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
BV2细胞类似产品::KYSE 520细胞、HCC-2108细胞、SKG3A细胞
7404细胞类似产品::4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞
C-33-A细胞类似产品::PVEC细胞、293c18细胞、NCI-H2107细胞
MDST8细胞类似产品::NCIH2286细胞、A-704细胞、MBdSMC细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁生长
细胞培养中的污染分为两类,化学污染和生物污染;生物污染包括比较容易发现的细菌、霉菌和酵母的污染,和较难发现的病毒、支原体和其他细胞的污染。细菌、霉菌和酵母到处存在,它们能在合适的环境中非常快速的生长。这些污染比较容易观察到,它们往往会使其污染的培养液产生可见的变化,或者通过显微镜观察就可以看见。由于病毒有种属异性,所以病毒污染的概率比较小。但是病毒污染难于发现,因为病毒颗粒别微小,一般的实验室都没能力检查细胞培养中污染的病毒。由于病毒一般潜伏在细胞内,对整个细胞培养不是致死的,所以它可能会使研究人员长期得到受病毒影响的细胞的实验结果。1956年Robinson及其同事首次发现细胞培养中的支原体污染。90年代初的一个调查发现,在美国培养的细胞中,至少有15%被支原体污染。由于支原体没有细胞壁,在细胞培养液中几乎是透明的,同时对常用于细胞培养中的抗生素不敏感,不引起pH变化,不使培养液浑浊,所以支原体污染不容易被发现,但是其存在会影响实验的结果。培养多种细胞时操作不当,会导致细胞的交叉污染。由于不同细胞的生产速率不同,污染的生长速率快的细胞终会完全取代被污染的细胞。
NCI-N87细胞类似产品::NRK细胞、NCI-H2196细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞
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NCI-SNU-761细胞类似产品::293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
NE-1细胞类似产品::159 PT细胞、MGC803细胞、HSC-6细胞
MCMEC细胞类似产品::IB-RS2细胞、HUT28细胞、PC-3/M细胞
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CNE-2 Cell|人鼻咽癌细胞
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Roswell Park Memorial Institute 1788细胞类似产品::EM3细胞、SGC7901/DDP细胞、C3H10T1/2细胞
LAPC-4细胞类似产品::MESSA Dx5细胞、COR-L51细胞、B95.8细胞
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HUTU80细胞类似产品::SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞
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H1793细胞类似产品::TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
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GM03571细胞类似产品::Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞
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HCC95细胞类似产品::RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
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