"McCoy fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
细胞背景资料：成纤维细胞
细胞形态：成纤维细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
3AA细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、LN299细胞、F9细胞
Tissue Culture-1细胞系相关产品：CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞
PG-4 (S+L-)细胞系相关产品：SB细胞、MCF7细胞、COC1/CDDP细胞
细胞生长：贴壁
McCoy fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
NH-6细胞系相关产品：SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞
MeT 5A细胞系相关产品：SW1783细胞、IPI-2I细胞、Panc 02.03细胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞系相关产品：SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞
MMAc-SF细胞系相关产品：HEB细胞、Kit-225-K6细胞、MB157细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
McCoy fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
MONO-MAC 6细胞系相关产品：H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞
KP-N-YN细胞系相关产品：SW-954细胞、Bovine ENDometrial cells细胞、COV504细胞
T. T细胞系相关产品：Experimental Mammary Tumour-6细胞、FDC-P1细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞
3T3F442A细胞系相关产品：Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
BL2141细胞系相关产品：CAL148细胞、MOVAS-1细胞、PL 45细胞
AN3 CA细胞系相关产品：BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞
MV-4:11细胞系相关产品：SUM-159-PT细胞、FHs74 Int细胞、H-1755细胞
CAL 39细胞系相关产品：MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
AN3-CA细胞系相关产品：UCLA-SO-M20细胞、GM16136细胞、SNK-1细胞
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McCoy fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
EU-4细胞系相关产品：FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
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MC-38细胞系相关产品：OE-21细胞、SUDHL8细胞、HeLa S3细胞
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NCIH2286细胞系相关产品：IHH-4细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、HCT/Taxo1细胞
C3H 10T1/2细胞系相关产品：CA 46细胞、H2126细胞、HCC44细胞
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Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞
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NCI-H1666细胞系相关产品：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞
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NCIH2196细胞系相关产品：HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞
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HT-55细胞系相关产品：BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
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LED-WiDr细胞系相关产品：SVOG细胞、H1404细胞、ARO-81细胞
HBL 100细胞系相关产品：RKOE6细胞、HCT 8细胞、ZR751细胞
HEK-2细胞系相关产品：HCC0366细胞、SUM-102细胞、Namalva细胞
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NCIH1373细胞系相关产品：H774细胞、BAR-T细胞、OVTOKO细胞
McCoy fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
Centre Antoine Lacassagne-12T细胞系相关产品：MDA MB 134VI细胞、HOS细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞
HFL-1细胞系相关产品：CCRF-SB细胞、H441细胞、L 1210细胞
NEC细胞系相关产品：U14细胞、3LL细胞、UACC 812细胞
T. T细胞系相关产品：Experimental Mammary Tumour-6细胞、CCD-19Lu细胞、TR146细胞
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