"CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌细胞系
细胞背景资料:肺腺癌;雌性;C57
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
Pt K1 (NBL-3)细胞系相关产品:Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞
WM 239细胞系相关产品:PAEC细胞、DLD-1细胞、HCT8细胞
NCIH1341细胞系相关产品:L5178-R细胞、WRL68细胞、HCC-827细胞
细胞生长:贴壁
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H-774细胞系相关产品:GM00637细胞、SKNBE细胞、GB-1细胞
OCI-Ly3细胞系相关产品:C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
SW-13细胞系相关产品:B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞
DC2.4细胞系相关产品:Psi-2-DAP细胞、PK136细胞、HNSC细胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞系相关产品:L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
BMDC细胞系相关产品:KGN细胞、AHH-1细胞、MDA MB 231细胞
Rat Glomerular Endothelial细胞系相关产品:NCIH747细胞、JeKo-1细胞、NCI747细胞
H23细胞系相关产品:EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品:GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
H-1437细胞系相关产品:H-64细胞、L02细胞、PA-TU S细胞
HGSMC细胞系相关产品:TE12细胞、RC92A细胞、NCI H82细胞
COLO829细胞系相关产品:HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
NCIH1694细胞系相关产品:GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
AQ-Mel细胞系相关产品:SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞
SCC15细胞系相关产品:H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌细胞系
LM-TK-细胞系相关产品:RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞
HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
Jiyoye细胞系相关产品:ABC-1细胞、LNCaP C4-2细胞、3AO细胞
P3JHR-1细胞系相关产品:SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞
OCILY7细胞系相关产品:SNU-520细胞、PT-67细胞、Hs839T细胞
HCa/16A3-F细胞系相关产品:SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞
HCa/16A3-F细胞系相关产品:SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞
HIT细胞系相关产品:SUM-52细胞、PLA801C细胞、MEL-526细胞
MB468细胞系相关产品:Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞
Ly10细胞系相关产品:SK-LU-1细胞、NRK 52E细胞、HT 144细胞
PL11细胞系相关产品:BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞
B16/F10细胞系相关产品:Panc_05_04细胞、CAL 39细胞、HCC366细胞
NCI-H1105细胞系相关产品:NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
KYSE450细胞系相关产品:NALM 6细胞、HEK293FT细胞、KMBC细胞
HCC-2935细胞系相关产品:746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品:M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞系相关产品:LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞
MUG-Chor1细胞系相关产品:Mv1.Lu细胞、L细胞、SW 1783细胞
FHs 74 Int细胞系相关产品:KPL1细胞、H-510细胞、HEC-251细胞
HCC1954 BL细胞系相关产品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞
CEMC1细胞系相关产品:DK-MG细胞、H9c2 (2-1)细胞、MDCK.2细胞
HBZY-1细胞系相关产品:OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞
ROS1728细胞系相关产品:T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
Ca 9-22细胞系相关产品:Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
HCT/Taxo1细胞系相关产品:NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞
SUP-T1细胞系相关产品:N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
KMS18细胞系相关产品:NS20-Y细胞、UCLA NPA-87-1细胞、JHH-7细胞
BC-021细胞系相关产品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞
KM H-2细胞系相关产品:NCI-H1838细胞、Kit 225细胞、AZ521细胞
Tb 1 Lu (NBL-12)细胞系相关产品:VMM-5A细胞、SU-DHL-2细胞、RASMCs细胞
G361细胞系相关产品:EBNA-293细胞、H-1755细胞、Ly10细胞
NCI-H650细胞系相关产品:SK 1细胞、COLO394细胞、Hs 600.T细胞
MDA1386细胞系相关产品:BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞
SLK细胞系相关产品:SUM-52-PE细胞、SK_N_BE2C细胞、CAMA细胞
PFSK细胞系相关产品:NCI H548细胞、RAW264细胞、SUSM-1细胞
Jurkat-E6细胞系相关产品:Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞
MAD109细胞系相关产品:Karpas422细胞、S16细胞、Hs-940细胞
L6细胞系相关产品:SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞
JEG3细胞系相关产品:L428细胞、CCRF-CEM C1细胞、HuO9细胞
TO175T细胞系相关产品:CMT167细胞、U-343 MG细胞、LM TK negative细胞
HH [Human lymphoma]细胞系相关产品:NCIH1184细胞、H-1882细胞、C2A细胞
LOU-NH-91细胞系相关产品:MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞
RGC5细胞系相关产品:HeLa.S3细胞、L- cell细胞、SW839细胞
Chang liver细胞系相关产品:COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞
X63.Ag8.653细胞系相关产品:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
SW1783细胞系相关产品:HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞
VE细胞系相关产品:GC-2spd(ts)细胞、LM3细胞、EA.Hy926细胞
NCI-H226细胞系相关产品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H820细胞、RA细胞
CCRF/CEM/0细胞系相关产品:H9c2(2-1)细胞、HCC-1419细胞、H661细胞
Mouse podocyte细胞系相关产品:PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
HNE2细胞系相关产品:SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
CMT64 epithelioid cells小鼠肺腺癌细胞系
Vero-E6细胞系相关产品:LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞
CBRH-7919细胞系相关产品:MH-S细胞、Colo16细胞、REC1细胞
COV 434细胞系相关产品:HEK/EBNA细胞、NCI-N87细胞、SKNBE(1)细胞
H2347细胞系相关产品:ChaGo-K1细胞、MMVECs细胞、16-HBEo细胞
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