"CMT64 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肺腺癌细胞
细胞背景资料：肺腺癌；雌性；C５７
细胞形态：上皮细胞样
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞生长：贴壁
CAL-62细胞类似产品：：mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞
VMCUB1细胞类似产品：：H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞
Ramos 1细胞类似产品：：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞
OCI/AML-4细胞类似产品：：IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞
SB细胞类似产品：：SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞
CMT64 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肺腺癌细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
PANC 203细胞类似产品：：TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞
Hi-five细胞类似产品：：HTh-74细胞、CAL851细胞、NCIH211细胞
JHH-2细胞类似产品：：MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
RCC-4细胞类似产品：：A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞
GA10细胞类似产品：：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
CMT64 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肺腺癌细胞
细胞生长特性：贴壁
MDA-MB435细胞类似产品：：BHK-21细胞、Me-Wo细胞、NCI-H1238细胞
ML2细胞类似产品：：HARA-B细胞、H-526细胞、SGC996细胞
HPDE6c7细胞类似产品：：B16F1细胞、BCPAP细胞、RCC 786-O细胞
C666-1细胞类似产品：：AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞
EC-109细胞类似产品：：HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞
NS-1-Ag4-1细胞类似产品：：H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
COV-434细胞类似产品：：HT-1376细胞、PNT-1A细胞、B16BL6细胞
RMS 1598细胞类似产品：：PC 61.5.3细胞、JJN-3细胞、NCIH1693细胞
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HCC95细胞类似产品：：RN-c细胞、Neuro-2a细胞、SV-HUC细胞
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TSCCa细胞类似产品：：UWB1-289细胞、Hs 863.T细胞、OCI-LY-8细胞
TSCCa细胞类似产品：：UWB1-289细胞、Hs 863.T细胞、OCI-LY-8细胞
NCIH2227细胞类似产品：：OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
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NCIH1155细胞类似产品：：LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
T2(174 x CEM.T2)细胞类似产品：：PANC.1细胞、H295R细胞、CNE2Z细胞
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OVCAR-10细胞类似产品：：IAR20细胞、NK-92MI细胞、Hs 895.T细胞
B958细胞类似产品：：J774A.1细胞、C4-2 Bone metastatic细胞、NCI-H2195细胞
L-6细胞类似产品：：L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
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NeHepLxHT细胞类似产品：：SNU-C2A细胞、SLMT1细胞、SNU449细胞
NCIH2029细胞类似产品：：16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
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HCC-1187细胞类似产品：：High 5细胞、Wistar Institute-38细胞、OCI-Ly8细胞
GES1细胞类似产品：：HEK293FT细胞、Hs832.Tc细胞、MG-HU-3细胞
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KY70细胞类似产品：：MC3T3-E1 Subclone 4细胞、SNU398细胞、Malme-3M细胞
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MLOY4细胞类似产品：：PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞
MLOY4细胞类似产品：：PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞
H209细胞类似产品：：HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞
HCC1954BL细胞类似产品：：HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞类似产品：：PG-4细胞、MESSA-DX5细胞、RCC4细胞
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MSB1细胞类似产品：：LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
Mv.1.Lu细胞类似产品：：YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
BV173细胞类似产品：：RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞
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HTori3细胞类似产品：：GM637A细胞、BIU-87/Adr细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞
JIII细胞类似产品：：MDA-MB-468细胞、HEP-3B2细胞、PC.3细胞
KMST-6细胞类似产品：：NPA87细胞、ARH-77细胞、SUM 159细胞
NIH3T3细胞类似产品：：MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞类似产品：：OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
NCI-H820细胞类似产品：：P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞
751-NA-15细胞类似产品：：SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞
L 132细胞类似产品：：Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、MES-13细胞、H1694细胞
WERIRb1细胞类似产品：：Clone 15 HL-60细胞、HCC0070细胞、Ly18细胞
LSECs细胞类似产品：：NCI-H295细胞、QGY7701细胞、DHL10细胞
Malme-3 M细胞类似产品：：KNS-62细胞、NS1-Ag 4/1细胞、SRS-82细胞
118 MG细胞类似产品：：HNE3细胞、LK-2细胞、B16/F10细胞
MKN45细胞类似产品：：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞
PC 12细胞类似产品：：RPMI-2650细胞、RPMI 6666细胞、SKN-SH细胞
Caco-2/BBe 1细胞类似产品：：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞
CMT64 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肺腺癌细胞
CAL78细胞类似产品：：MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
RS4-11细胞类似产品：：H1688细胞、H-292细胞、C-643细胞
LCLC103H细胞类似产品：：CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞
OCI-Ly 7细胞类似产品：：H220细胞、253J-BV细胞、Tsup-1细胞
HT-55细胞类似产品：：BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
OCI-LY-8细胞类似产品：：SKO007细胞、NCI-H2591细胞、HOP-62细胞
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P3J HR1-K细胞类似产品：：A-101D细胞、HCC1008细胞、NCIH1563细胞
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COLO-699细胞类似产品：：LI7细胞、CMT-64细胞、BSC-1细胞
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NS1-Ag4/1细胞类似产品：：MHH-CALL2细胞、MDA-MB-175细胞、BHK细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞类似产品：：GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
CAL851细胞类似产品：：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞
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ES2细胞类似产品：：OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞
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CA 46细胞类似产品：：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
NCI.H23细胞类似产品：：KYSE450细胞、751细胞、AG06814-J细胞
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