"EOMA epithelioid cells小鼠血管内皮瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
MN60细胞系相关产品:COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞
HCC1954BL细胞系相关产品:HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
EU-4细胞系相关产品:FUOV1细胞、ZYM-DIEC02细胞、HEK-293F细胞
细胞生长:贴壁
EOMA epithelioid cells小鼠血管内皮瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。
细胞传代方法:1:2传代
MNNG/HOS Clone F-5细胞系相关产品:SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞
ARPE-19细胞系相关产品:CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
CF-PAC1细胞系相关产品:NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞
Hs-343-T细胞系相关产品:FL83B细胞、RCK-8细胞、HCT FET细胞
LA 4细胞系相关产品:T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
EOMA epithelioid cells小鼠血管内皮瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:上皮样
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
P-36细胞系相关产品:HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞
MDA-MB-468-RED细胞系相关产品:GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞
KBM5细胞系相关产品:KMM-1细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、NW38细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
G361-mel细胞系相关产品:KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞
NPA 87细胞系相关产品:L-6TG细胞、32Dcl3细胞、Swiss 3T3细胞
HCCC-9810细胞系相关产品:ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞
HTR-8/SV neo细胞系相关产品:BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞
130T细胞系相关产品:L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞
MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品:EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞
EOMA epithelioid cells小鼠血管内皮瘤细胞系
DAN-G细胞系相关产品:aNK细胞、MC 3T3-E1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞
P3JHR1细胞系相关产品:CEMC7细胞、ECC-10细胞、JB6Cl30细胞
WM115细胞系相关产品:NE1细胞、SN12PM6细胞、Jurkat FHCRC细胞
MC-26细胞系相关产品:HCC-1428细胞、C3A细胞、Hs 683细胞
MHCC97-H细胞系相关产品:Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、RIN m5F细胞、MC3T3-E1(C4)细胞
HEK/EBNA细胞系相关产品:K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞
HEK/EBNA细胞系相关产品:K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞
50.B1细胞系相关产品:TOV21G细胞、WIL2 S细胞、SW579细胞
GM00637B细胞系相关产品:Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞
OPM-2细胞系相关产品:NK-92MI细胞、OVCAR-420细胞、MSC细胞
HNE-1细胞系相关产品:SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞
NCC-IT细胞系相关产品:NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
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Panc_02_03细胞系相关产品:OCI-LY-19细胞、HCC1954-BL细胞、KU1919细胞
SN12CPM6细胞系相关产品:SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
JB6 Cl 30细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、HEY-A8细胞、NCIH1184细胞
NCCIT细胞系相关产品:L-929细胞、Ca Ski细胞、NPC-TW01细胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞系相关产品:NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞
SN-12C细胞系相关产品:BRL 3A细胞、KM.12细胞、MCF7细胞
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品:SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞
HFL-I细胞系相关产品:Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞
Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品:HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞
HUTU80细胞系相关产品:SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞
NPA87细胞系相关产品:DU 145细胞、Sc-1细胞、SHEP1细胞
ssMCF7细胞系相关产品:Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
EL-4细胞系相关产品:NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞
SK MES 1细胞系相关产品:OVCAR.3细胞、D-283MED细胞、LNCaP C4-2细胞
Mel624细胞系相关产品:NCIH847细胞、CAL 148细胞、SK Mel 24细胞
SKMES1细胞系相关产品:MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞
LS 180细胞系相关产品:HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
NCIH2030细胞系相关产品:DoHH-2细胞、RH-30细胞、GP2-293细胞
Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞
ACT-1细胞系相关产品:LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
EAhy926细胞系相关产品:Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
HSAS3细胞系相关产品:PE/CA-PJ-34细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞、HUTU80细胞
LN382细胞系相关产品:526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
NCI-H524细胞系相关产品:DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
RCC4细胞系相关产品:KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品:Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞
CCD966SK细胞系相关产品:KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞
ECC 10细胞系相关产品:LC1-Sq细胞、HCC-2218细胞、HEEpiC细胞
SaOS-2细胞系相关产品:A2058细胞、HO8910PM细胞、LNCaP-FGC细胞
INS1E细胞系相关产品:HEC1B细胞、KTCTL140细胞、HEK 293T/17细胞
H28细胞系相关产品:H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞
Hs832T细胞系相关产品:PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
MDAMB157细胞系相关产品:MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
CL MC/9细胞系相关产品:HFL 1细胞、Walker256-TC细胞、NOR-10细胞
UMRC-2细胞系相关产品:RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
SU86.86细胞系相关产品:NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞
MuM-2B细胞系相关产品:MNNG细胞、KYSE 70细胞、CL34细胞
DU145细胞系相关产品:RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞
EOMA epithelioid cells小鼠血管内皮瘤细胞系
SW1271细胞系相关产品:BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞
SNU-C1细胞系相关产品:NGP细胞、C1R细胞、SBC-3细胞
FHL-124细胞系相关产品:SK-MEL3细胞、SNU5细胞、Monomac-1细胞
KBM-5细胞系相关产品:BPH-1细胞、TOV112细胞、Opossum Kidney细胞
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