"NCI-H295R Cell:人肾上腺皮质腺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：肾上腺皮质癌；女性
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品：MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
Hs832.Tc细胞系相关产品：Vero 76细胞、MDAMB231细胞、NCI-A549细胞
293-EBNA细胞系相关产品：Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞、NRK49F细胞、CBRH-7919细胞
mIMCD-3细胞系相关产品：NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H295R Cell:人肾上腺皮质腺癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
COV-434细胞系相关产品：HT-1376细胞、PNT-1A细胞、B16BL6细胞
CG4细胞系相关产品：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
H2029细胞系相关产品：CAL27细胞、Panc08.13细胞、Hs 274细胞
TALL-104细胞系相关产品：Mino细胞、LTEP-sm 1细胞、HEK-293-EBNA细胞
细胞生长特性：贴壁
NCI-H295R Cell:人肾上腺皮质腺癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞形态特性：详见细胞说明书
2V6.11细胞系相关产品：IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
CRFK细胞系相关产品：TCC-PAN2细胞、JVM3细胞、NCI.H522细胞
Hs 832(C).T细胞系相关产品：H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞
WIL2S细胞系相关产品：TGW细胞、HOC细胞、SF-539细胞
Y3-Ag1,2,3细胞系相关产品：HO-8910细胞、CD18/HPAF细胞、LLC-MK2细胞
9L细胞系相关产品：ZYM-DIEC02细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、HCC1008细胞
TOV21细胞系相关产品：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞
NCI-H295R Cell:人肾上腺皮质腺癌细胞系
KU812-F细胞系相关产品：639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞
IPLB-Sf21AE细胞系相关产品：NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞
JHH-7细胞系相关产品：GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞
C28/I2细胞系相关产品：CHO/dhFr-细胞、Hos TE-85细胞、526 mel细胞
EAC细胞系相关产品：U-373 MG细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、Swiss-3T3细胞
Madin Darby Canine Kidney细胞系相关产品：M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
GM00637细胞系相关产品：KYSE0410细胞、H847细胞、CTSC-3细胞
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞
SUM 190细胞系相关产品：SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞
SUM 190细胞系相关产品：SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞
KFB细胞系相关产品：YAC-1细胞、KYSE0030细胞、TK-10细胞
Mel624细胞系相关产品：NCIH847细胞、CAL 148细胞、SK Mel 24细胞
KOPN-8细胞系相关产品：NCI-H1954细胞、FRO 81-2细胞、SW 1088细胞
P3X63Ag8.653细胞系相关产品：SW 48细胞、CMT-167细胞、Beta-TC-6细胞
CEM-C7细胞系相关产品：CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
NCIH2227细胞系相关产品：OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
PANC-04-03细胞系相关产品：MPC-83细胞、ADR-RES细胞、H-II-E-C3细胞
Panc_05_04细胞系相关产品：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
L78细胞系相关产品：L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞
EST50细胞系相关产品：CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞
WM115细胞系相关产品：NE1细胞、SN12PM6细胞、Jurkat FHCRC细胞
U031细胞系相关产品：HEL299细胞、NCIH1385细胞、CCF-STTG1细胞
H1963细胞系相关产品：SK Col 1细胞、GA-10 clone 4细胞、MCF-7/ADR细胞
T8细胞系相关产品：Lu-65细胞、SK-SH-SY5Y细胞、RCC23细胞
RPMI7666细胞系相关产品：MFD-1细胞、EFM192C细胞、Panc_05_04细胞
UCLA-SO-M20细胞系相关产品：HCC-2935细胞、Henrietta Lacks cells细胞、BC-3H-1细胞
b.End3细胞系相关产品：Calu 6细胞、C1498细胞、8305-C细胞
EnCa1细胞系相关产品：K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞
HEL-299细胞系相关产品：EoL-1细胞、TE3A细胞、NCIH810细胞
C2BBe 1细胞系相关产品：KYSE-510细胞、Hepa-RG细胞、130T细胞
RS4:11细胞系相关产品：PC-3/M细胞、Ramos (RA 1)细胞、COLO-394细胞
TE9细胞系相关产品：GM03569细胞、NCIH838细胞、RPMI-6666细胞
A-375SM细胞系相关产品：HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞
NCI660细胞系相关产品：87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
TYKnu细胞系相关产品：NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞
H-2170细胞系相关产品：WILL-2细胞、Y-79细胞、RN-c细胞
Granta-519细胞系相关产品：RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品：CEMx721.174.T2细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞、Hs839.T细胞
COLO-741细胞系相关产品：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
COLO-741细胞系相关产品：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞
YD-38细胞系相关产品：H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞
A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
NCI-H295R Cell:人肾上腺皮质腺癌细胞系
GM05862细胞系相关产品：H-1404细胞、Hs695T细胞、OVCA-433细胞
Renal Carcinoma细胞系相关产品：LNCaP subline C4-2细胞、H9c2细胞、Hs 888.T细胞
NPC-TW039细胞系相关产品：Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞
Metastatic Variant 522细胞系相关产品：ZR-75-30细胞、MV3细胞、MKN-74细胞
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
MAVER-1细胞系相关产品：AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞
GM02131A细胞系相关产品：B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞
SJ-Rh 30细胞系相关产品：LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
SGC-996细胞系相关产品：Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞
FRhK4细胞系相关产品：NCIH508细胞、CCLP-1细胞、Tn 5B1-4细胞
SU86-86细胞系相关产品：H-4细胞、S3 HeLa细胞、UPCI:SCC090细胞
MOLM13细胞系相关产品：CAL 85-1细胞、M2-10B4细胞、KLM-1细胞
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