"SK-OV-3 Cell:人卵巢癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
OCI-Ly8细胞系相关产品:FRTL5细胞、LCMS细胞、NCI-H69细胞
C3H-10T1/2细胞系相关产品:MUTZ-3细胞、ATN1细胞、Hs 281.T细胞
RKOE6细胞系相关产品:SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞
SK-LU-1细胞系相关产品:OCI-Ly 3细胞、LN 382细胞、211H细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SK-OV-3 Cell:人卵巢癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PNT1A细胞系相关产品:RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
HS-683细胞系相关产品:HTori3细胞、OK-WT细胞、HCC 38细胞
NCIH1792细胞系相关产品:HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞
CW-2细胞系相关产品:NCIH2066细胞、C-4 I细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞
细胞生长特性:贴壁
SK-OV-3 Cell:人卵巢癌细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:上皮细胞样
CALU 1细胞系相关产品:GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞
32Dcl3细胞系相关产品:NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞
P-388D1细胞系相关产品:OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞
TCCPAN2细胞系相关产品:HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞
SKMEL24细胞系相关产品:32D clone 3细胞、UMNSAH/DF-1细胞、RGC6细胞
NBL-12细胞系相关产品:PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞
HIEC-6细胞系相关产品:GM04679细胞、SW1573细胞、RPMI2650细胞
SK-OV-3 Cell:人卵巢癌细胞系
Madin-Darby Bovine Kidney细胞系相关产品:C3H/10T1/2细胞、WM 239-A细胞、U-266 AR1细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
SNU-719细胞系相关产品:HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞
SK-MEL24细胞系相关产品:IGROV 1细胞、EFM192B细胞、COLO-1细胞
HTR-8/SV neo细胞系相关产品:BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞
EFM-19细胞系相关产品:SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞
NCI-H2591细胞系相关产品:AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞
SK MEL 5细胞系相关产品:OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞
HCC-1588细胞系相关产品:H-2087细胞、ARH77细胞、KU 19-19细胞
HCC-1588细胞系相关产品:H-2087细胞、ARH77细胞、KU 19-19细胞
Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品:PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞
MH7A细胞系相关产品:HOK细胞、BHP-10细胞、H1793细胞
H-2073细胞系相关产品:Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞
130T细胞系相关产品:L 132细胞、HuPT4细胞、F81细胞
PTK2细胞系相关产品:JIII细胞、OVCAR3细胞、MDA-MB-435 S细胞
CCC-HSF-1细胞系相关产品:McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞
NCI-H810细胞系相关产品:ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞
786.O细胞系相关产品:NCIH2347细胞、Caov-3细胞、NCIH1838细胞
UO-31细胞系相关产品:Human Kidney-2细胞、PC2细胞、MC-3T3细胞
HepaRG细胞系相关产品:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
MV4:11细胞系相关产品:P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞
SF539细胞系相关产品:K562细胞、SJ-Rh 30细胞、3T3NIH细胞
beta-TC6细胞系相关产品:BCPAP细胞、TE3细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞
MFHL-2细胞系相关产品:Normal fibroblast-10细胞、KLN205细胞、H-2198细胞
CL40细胞系相关产品:HEK-293H细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞、B16BL-6细胞
TW01细胞系相关产品:WEHI3B细胞、CCD966SK细胞、SKRC-39细胞
Ca761细胞系相关产品:NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
HCC941122细胞系相关产品:NCI-H1963细胞、Blotchy fibroblast-11细胞、H-1793细胞
MDA330细胞系相关产品:Pt K2细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞、ROS-17/2.8细胞
Pa017C细胞系相关产品:PLA802细胞、CWR22Rv1细胞、Li-7细胞
IEC-6细胞系相关产品:AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
HRMC细胞系相关产品:Institute for Medical Research-90细胞、3T3-Swiss细胞、Hs852T细胞
Capan-2细胞系相关产品:H-1341细胞、NOR 10细胞、NG10815细胞
CHP100细胞系相关产品:NIH:OVCAR-5细胞、NCI-1155细胞、PLB985细胞
L- cell细胞系相关产品:UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
HR1K细胞系相关产品:JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞
G-292 clone A141B1细胞系相关产品:EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞
TPC1细胞系相关产品:TE-4细胞、Mono Mac 1细胞、U-373MG细胞
SACC-LM细胞系相关产品:HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞
ATC241细胞系相关产品:HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
Malme3M细胞系相关产品:NCIH1993细胞、MDCK2细胞、HEP3B2细胞
OKT3细胞系相关产品:TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
A-72细胞系相关产品:MDA-157细胞、aTC1 Clone 6细胞、NU-GC-4细胞
SK-OV-3 Cell:人卵巢癌细胞系
NCIH647细胞系相关产品:Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞
RKN细胞系相关产品:Tu177细胞、OE33细胞、ECV304细胞
H196细胞系相关产品:WM-2664细胞、HcaF细胞、GM01232细胞
38C13细胞系相关产品:YH细胞、P31-FUJ细胞、Tn5 B1-4细胞
KYSE 270细胞系相关产品:HOP92细胞、Hs739T细胞、G-361细胞
253JBV细胞系相关产品:BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞
UCLA RO-81A-1细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、Hep3B细胞、M14-MEL细胞
OK细胞系相关产品:Y3-Ag123细胞、C-8161细胞、KU 812细胞
HBE135-E6E7细胞系相关产品:WERIRb1细胞、NFS 60细胞、GalK1细胞
HCC 38细胞系相关产品:NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞
H1435细胞系相关产品:Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞
C3H10T1-2细胞系相关产品:V79-1细胞、MDA-157细胞、CHL/IU细胞
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