"A-549 Cell:人肺癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
UMC-11细胞系相关产品:Human Embryo Kidney-2细胞、TSCCa细胞、SNU-620细胞
RPMI-7951细胞系相关产品:HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞
VP267细胞系相关产品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
Caco2-BBE细胞系相关产品:Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A-549 Cell:人肺癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H-1092细胞系相关产品:Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
TE-3A细胞系相关产品:COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
ECV-304细胞系相关产品:National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞
MCM细胞系相关产品:P-36细胞、C3H 10T1/2细胞、MFE280细胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞系相关产品:Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、201T细胞、Hs695T细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
A-549 Cell:人肺癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
NSH细胞系相关产品:THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
Leukemic 1210细胞系相关产品:NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
Ca761细胞系相关产品:NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
MDAMB453细胞系相关产品:MDA-MB-436细胞、H-1651细胞、SK-ML2细胞
16HBE140细胞系相关产品:NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
NCI-H660细胞系相关产品:SK-MEL5细胞、GM03573细胞、LS 1034细胞
CNE细胞系相关产品:JB6Cl30细胞、SP-2细胞、MC26细胞
A-549 Cell:人肺癌细胞系
NCI-A549细胞系相关产品:M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
RC-4B/C细胞系相关产品:SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞
IOSE-29细胞系相关产品:LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞
RIN14B细胞系相关产品:CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
HCC-1428细胞系相关产品:BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞
PLMVEC细胞系相关产品:JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
COV 504细胞系相关产品:HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞
TE6细胞系相关产品:MEF细胞、Hs 274.T细胞、DLM8细胞
NCIH1836细胞系相关产品:WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
NCIH1836细胞系相关产品:WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
BC-027细胞系相关产品:MOVAS细胞、SW 620细胞、CT-26 WT细胞
H-II-E-C3细胞系相关产品:beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞
L M (TK-)细胞系相关产品:UT-7细胞、FRTL-5细胞、58F细胞
CEM-C7细胞系相关产品:CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
WM 451-Lu细胞系相关产品:HCC2185细胞、H-716细胞、MKN 45细胞
HT-115细胞系相关产品:32D.3细胞、HSMC细胞、A-172 MG细胞
mREC细胞系相关产品:SKNBE(2c)细胞、16-HBE14o细胞、LLC-PK-1细胞
MDAMB134细胞系相关产品:HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞
HLEpiC细胞系相关产品:Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
HS-695T细胞系相关产品:HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞系相关产品:QGY7701细胞、CNE-2细胞、PK (15)细胞
M 1细胞系相关产品:32D.cl3细胞、NCIH187细胞、639 V细胞
COLO829细胞系相关产品:HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
Hs606T细胞系相关产品:FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
BIU-87/Adr细胞系相关产品:OVCA 432细胞、PF-382细胞、KYSE50细胞
MRCV细胞系相关产品:NCI-H524细胞、BEP2D细胞、D-283细胞
LS123细胞系相关产品:HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
COLO 738细胞系相关产品:T 98 G细胞、Hs 688(A).T细胞、P560细胞
AR4-2J细胞系相关产品:Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞
ARO81细胞系相关产品:SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞
WEHI 231细胞系相关产品:Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞
Daudi细胞系相关产品:SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞
SLMT1细胞系相关产品:L 428细胞、SK-N-F1细胞、HEC-1-B细胞
NCI-A549细胞系相关产品:M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
RMG1细胞系相关产品:MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
SUM 159PT细胞系相关产品:GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞
786O细胞系相关产品:OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
RSC 96细胞系相关产品:Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
H7721细胞系相关产品:OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞
BCPAP细胞系相关产品:NCCIT细胞、X63-AG 8.653细胞、COLO-357细胞
CCK-81细胞系相关产品:H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品:MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
U118-MG细胞系相关产品:SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
A-549 Cell:人肺癌细胞系
SIRC细胞系相关产品:YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞
COLO829细胞系相关产品:HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
SCC 25细胞系相关产品:NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞
MHCC 97-H细胞系相关产品:NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞
M210B4细胞系相关产品:BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞
MDAMB435S细胞系相关产品:Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
H1648细胞系相关产品:HFSF细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、HBE细胞
Mono Mac 6细胞系相关产品:CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
MB39细胞系相关产品:Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
HIT T15细胞系相关产品:SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
C57 Mouse Tumor 93细胞系相关产品:Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞
H2405细胞系相关产品:BALL-1细胞、MSB-1细胞、PCI-4M细胞
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